人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 新品

人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒

一、技术原理与创新特性:

高敏检测系统设计：

糖基化特异性识别：采用抗人EPO α-螺旋结构域单抗（克隆AE7A5）作为捕获抗体，结合唾液酸敏感型检测抗体（克隆Hep-1）实现糖基化形式检测

功能状态区分：通过等电聚焦预处理可分离天然EPO与重组EPO（如epoetin-α/β）

抗干扰优化：添加转铁蛋白受体阻断剂消除假阳性（特别适用于贫血患者样本）

025年技术升级：

新增缺氧诱导因子（HIF）调控活性检测模块

标准品溯源至WHO国际标准（NIBSC 13/170）

微孔板采用仿生骨髓微环境涂层（批内CV降至2.3%）

二、试剂盒配置与关键参数

标准组件清单：

预包被96孔板（8×12可拆，充氮包装）

重组人EPO标准品（6梯度：1-500 mIU/mL，含NIBSC比对证书）

检测系统：

钌标记链霉亲和素（4℃避光稳定18个月）

TPA电化学发光底物（动态范围扩展20倍）

专用血清稳定剂（含蛋白酶抑制剂）

性能指标：

参数  规格  临床意义

检测范围  1-500 mIU/mL  覆盖生理和药理浓度

灵敏度  0.3 mIU/mL  可检测早期缺氧反应

精密度  板内CV<3%，板间CV<6%  符合WADA反兴奋剂标准

特异性  与TPO交叉反应<0.01%  确保检测特异性

三、实验操作标准化流程

样本处理规范：

血清采集：推荐使用硅化真空管（减少血小板激活）

稳定性数据：

室温：≤2小时（需立即离心）

-80℃：≤5年（避免反复冻融）

特殊处理：

肾衰患者样本需1:5预稀释

脑脊液需超滤浓缩后检测

优化操作步骤：

酸处理：pH 2.5甘氨酸缓冲液激活潜在形式

加样策略：采用蛇形加样顺序减少边缘效应

关键孵育：37℃恒温振荡（700rpm）75分钟

信号检测：电化学发光读数（积分时间400ms）

四、临床应用与科研价值

疾病诊断临界值：

肾性贫血：<5 mIU/mL（敏感性92%，特异性88%）

真性红细胞增多症：>20 mIU/mL排除诊断

兴奋剂检测：等电聚焦图谱异常提示重组EPO滥用

2025年研究前沿：

发现EPO通过EPOR-βcR异源二聚体激活神经保护通路

非造血EPO类似物（ARA-290）治疗糖尿病神经病变III期临床

单细胞测序揭示肾脏间质细胞亚群特异性分泌机制

五、质量控制与问题处理

质控标准：

标准曲线要求：4参数拟合R2≥0.998

必检参数：

空白信号<500 RLU

质控品回收率90-110%

公司正在出售的产品：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。