人多巴胺脱羧酶(DDC)ELISA试剂盒 新品

商品属性

保存条件：2-8℃冷藏，避免反复冻融，有效期通常为6-12个月。

检测原理

采用双抗体夹心法：

预包被抗人IL-17A抗体捕获样本中的IL-17A。

加入HRP标记的检测抗体形成复合物。

通过底物显色反应（TMB）测定450nm波长下的吸光度（OD值），浓度与OD值呈正相关。

操作步骤

试剂准备

平衡：所有组分使用前需室温平衡20-30分钟。

标准品：按说明书梯度稀释（通常为0-500 pg/mL）。

加样与孵育

标准品孔：加入50μL不同浓度标准品。

样本孔：加入10μL待测样本+40μL稀释液（或直接加50μL，依说明书调整）。

空白孔：仅加样本稀释液。

每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育60分钟。

洗涤

弃液后拍干，每孔加满洗涤液（PBS+0.05% Tween-20），重复洗板5次。

显色与终止

加底物A/B各50μL，避光孵育15分钟。

加入终止液50μL，颜色由蓝变黄。

检测

15分钟内于450nm读取OD值（校正波长630nm）。

数据分析

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线。

样本浓度通过曲线方程计算，复孔CV值应＜10%。

注意事项

样本处理：血清/血浆需离心去除杂质，避免溶血；细胞培养上清需去除沉淀。

实验控制：建议设置复孔，标准曲线R²≥0.99。

干扰因素：避免反复冻融样本，高脂血症样本可能需额外处理。

安全防护：终止液含硫酸，需佩戴手套操作。

性能参数

灵敏度：通常＜5 pg/mL。

检测范围：15.6-1000 pg/mL（常见区间）。

特异性：不与IL-17F等其他细胞因子交叉反应。

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