人甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒

商品属性

产品用途

本试剂盒用于定量检测大鼠血清、血浆或组织样本中的甲胎蛋白（AFP）含量，适用于科研实验，不适用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将抗大鼠AFP抗体包被于微孔板形成固相抗体，加入样本后，AFP与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成复合物。洗涤后加入TMB底物显色，颜色深浅与样本中AFP浓度成正比，通过450nm波长测定OD值，结合标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

96孔配置：

预包被酶标板（96孔）

AFP标准品（400μg/L，0.6mL）

HRP标记抗体（1瓶）

TMB显色液（A/B液）

终止液（1瓶）

洗涤缓冲液（浓缩液，需稀释）

封板膜、说明书

48孔配置：

半块酶标板（48孔）

标准品（0.3mL）及其他组分按比例减少

样本要求

样本类型：血清、血浆或组织匀浆液（需离心去除杂质）。

保存条件：2-8℃短期保存，-20℃长期保存，避免反复冻融。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释标准品。

加样：每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育1小时。

洗涤：弃液后拍干，用洗涤液洗板5次。

加酶标抗体：每孔加入HRP标记抗体100μL，37℃孵育30分钟。

显色：加入TMB底物，避光反应15分钟。

终止与检测：加入终止液，30分钟内测定450nm吸光度。

结果计算

以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过样本OD值计算AFP浓度。

注意事项

试剂盒保存于2-8℃，使用前平衡至室温。

避免交叉污染，不同批次试剂不可混用。

显色时间需严格控制，终止后颜色不稳定。

有效期

未开封试剂盒有效期为12个月，开封后需按组分标注条件保存并在短期内使用。

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