人YY肽(PYY)ELISA试剂盒

预期用途

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测人血清、血浆或其他生物液体中YY肽（PYY）的含量，适用于科研实验，不用于临床诊断。

实验原理

采用双抗体夹心法。将纯化的PYY抗体包被于微孔板形成固相载体，依次加入待测样本或标准品、生物素标记的PYY抗体及HRP标记的亲和素。经洗涤后，加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸性终止液作用下转为黄色。颜色深度与样本中PYY浓度呈正相关，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板：96孔（可拆卸）

标准品（冻干粉）：2瓶，临用前以稀释液复溶至1 mL，初始浓度6,000 pg/mL，可梯度稀释为3,000、1,500、750、375、188、94 pg/mL，稀释液作为0 pg/mL空白对照。

生物素化抗体：0.4 mL（30倍浓缩）

酶结合物：HRP标记亲和素，12 mL

显色液：TMB底物，15 mL

终止液：1N硫酸，12 mL

洗涤缓冲液（40×浓缩）：50 mL，使用前需稀释。

封板膜：2张

操作步骤

标准品制备：按说明书梯度稀释，避免孔内直接稀释。

加样：每孔加入样本或标准品100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后以洗涤液注满孔板，静置30秒，重复5次。

加生物素化抗体：每孔100 μL，37℃孵育60分钟。

加酶结合物：每孔100 μL，37℃避光反应30分钟。

显色：加入TMB底物100 μL，避光显色15分钟。

终止与检测：加入终止液50 μL，5分钟内测定450 nm OD值。

注意事项

试剂盒保存于2–8℃，复溶后标准品需一次性使用。

避免反复冻融样本，溶血或高脂样本可能干扰结果。

操作时需佩戴防护用具，终止液具腐蚀性。

性能参数

灵敏度：<10 pg/mL

检测范围：31.25–2,000 pg/mL

批内变异系数：<10%，批间<15%。

有效期

6个月（见外包装标签）。

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