人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清液或其他生物体液中的软骨寡聚基质蛋白（COMP）含量，适用于科研用途。

实验原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）。将抗人COMP单克隆抗体包被于微孔板，样本中的COMP与固相抗体结合后，依次加入生物素化抗人COMP抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，形成复合物。加入TMB底物显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。450 nm波长下测定吸光度（OD值），COMP浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组成（2–8℃保存）

预包被酶标板：96孔（抗人COMP单抗包被）。

标准品：2瓶冻干粉（10000 ng/瓶或60 ng/ml初始浓度），临用前需用稀释液重构并梯度稀释（如60 ng/ml至0.94 ng/ml系列）。

酶标抗体工作液：12 mL（生物素化抗人COMP抗体）。

标本稀释液：12 mL（10×浓缩液，需稀释后使用）。

洗涤缓冲液：50 mL（20×浓缩液，使用时按比例稀释）。

TMB底物工作液：避光保存，显色用。

终止液（未明确提及但常规含1M硫酸）。

操作步骤概要

标准品制备：冻干标准品用稀释液重构，静置10分钟后混匀，梯度稀释至所需浓度（避免孔内直接稀释）。

加样：依次加入标准品或样本、生物素化抗体、HRP标记亲和素，每步后充分洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应后终止，450 nm测OD值。

计算：以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线，拟合方程计算样本浓度。

注意事项

试剂盒需在有效期内使用，避免反复冻融标准品或样本。

洗涤步骤需彻底，避免交叉污染。

显色时间需严格控制，终止后30分钟内完成检测。

储存及有效期

未开封试剂盒2–8℃保存，有效期见外包装；开封后组分按标签要求储存（如酶标抗体需避光）。

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