人半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），定量检测人血清、血浆及相关液体样本中半乳糖凝集素-9（Galectin-9/GAL9）的浓度，适用于科研实验，不可用于临床诊断或人体实验。

实验原理

固相抗体包被：微孔板预包被高纯度人GAL9特异性抗体。

抗原-抗体结合：样本中的GAL9与固相抗体结合后，加入HRP标记的检测抗体形成复合物。

显色反应：复合物催化底物TMB显色（蓝色→黄色），颜色深度与样本中GAL9浓度呈正相关。

定量分析：通过450 nm波长测定OD值，参照标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

GAL9标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

浓缩洗涤缓冲液（需稀释）

封板膜、说明书

样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞培养上清或组织匀浆。

处理：避免反复冻融，离心去除颗粒物；细胞上清需确保细胞状态稳定。

稀释：部分样本需按说明书稀释，最终浓度需乘以稀释倍数。

操作步骤

平衡：试剂盒室温平衡20分钟，浓缩洗涤液水浴溶解结晶。

加样：依次加入标准品、样本（100 μL/孔），37℃孵育90分钟。

洗涤：弃液后加洗涤液，重复5次。

加检测抗体：HRP标记抗体（100 μL/孔），37℃孵育60分钟。

显色：加入TMB（90 μL/孔），避光反应15-30分钟。

终止：加入终止液（50 μL/孔），立即测定OD450 nm。

注意事项

保存条件：未开封试剂盒2-8℃避光保存，有效期6个月；开封板条需密封防潮。

实验控制：每批次需同步标准曲线，建议复孔检测。

干扰因素：避免使用化学裂解液处理样本，以防假性结果。

仪器要求：需酶标仪（450 nm）、精密移液器（0.5-1000 μL）及37℃恒温箱。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线（四参数拟合）。

样本浓度通过曲线方程计算，超出范围需稀释后重测。

性能参数

检测限：1 pg/mL（具体以批次说明书为准）。

特异性：与人GAL9特异性结合，无交叉反应。

精密度：板内、板间变异系数均＜10%。

免责声明

实验结果受操作规范、样本质量及环境因素影响，建议预留备份样本。不同批次试剂可能存在检测限差异，请以实际说明书为准。

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