人苄氯素1(BECN1)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆或其他相关液体样本中抑癌基因Beclin 1 (BECN1)的含量。适用于科研及临床研究，不用于诊断。

技术参数

检测范围：具体范围需参考标准曲线（通常为0.1–100 ng/mL，以实际说明书为准）。

灵敏度：最低检测限≤0.1 ng/mL。

适用样本：人血清、血浆、细胞培养上清液等（需避免溶血或反复冻融）。

保存条件：2–8℃避光保存，复溶后的标准品需分装冷冻（-20℃）。

有效期：6个月（未开封状态下）。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被抗人BECN1单克隆抗体。

抗原结合：样本中的BECN1与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：加入TMB底物后，在HRP催化下显蓝色，终止液转化为黄色，OD值与BECN1浓度正相关。

操作步骤

样本准备：离心去除颗粒物，稀释高浓度样本（建议预实验确定稀释倍数）。

试剂平衡：所有组分室温平衡30分钟。

加样与孵育：

加入标准品或样本（100 μL/孔），37℃孵育60分钟。

洗涤后加入酶标抗体（100 μL/孔），37℃孵育30分钟。

显色与终止：加入TMB底物避光反应15分钟，终止液终止反应。

检测：450 nm波长读取OD值（参考630 nm校正）。

结果计算

以标准品浓度为横坐标（X）、OD值为纵坐标（Y）绘制标准曲线，通过拟合方程计算样本浓度。

注意事项

质量控制：建议复孔检测，标准曲线R²≥0.99。

干扰因素：避免样本反复冻融、细菌污染或高脂血症。

安全防护：TMB和终止液具腐蚀性，需穿戴防护用具。

储存要求：未使用的酶标板条需密封干燥保存。

性能指标

精密度：板内、板间变异系数（CV）均<10%。

特异性：不与其他人源蛋白交叉反应。

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