人谷胱甘肽还原酶(GR)ELISA试剂盒

概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），用于定量检测人血清、血浆、细胞上清液及组织匀浆等样本中谷胱甘肽还原酶（GR）的活性或浓度。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

实验原理

包被抗体：微孔板预包被高纯度人GR特异性抗体，形成固相捕获体系。

抗原结合：样本中的GR与固相抗体结合后，加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

显色反应：复合物催化底物TMB显色，经酸化后转化为黄色终产物，其吸光度（OD值）与样本中GR浓度呈正相关。

检测：酶标仪于450 nm波长测定OD值，通过标准曲线计算目标浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板

GR标准品（冻干粉或液体）

HRP标记检测抗体

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（浓缩液）

样本稀释液

样本处理

血清/血浆：采集后需离心（3000 rpm，10分钟）分离，避免溶血或反复冻融。

细胞上清液：离心去除颗粒物后取上清。

组织匀浆：按比例加入生理盐水匀浆，离心后取上清。

注：样本建议分装保存于-80℃，避免反复冻融。

操作步骤

标准品复溶：按说明书稀释至系列浓度。

加样：依次加入标准品、样本至微孔，孵育后洗涤。

酶标抗体孵育：加入HRP标记抗体，洗涤去除未结合物。

显色与终止：加入TMB避光显色，终止后30分钟内检测。

注意事项

储存条件：未开封试剂盒需保存于2-8℃，复溶后标准品不可重复使用。

操作规范：

避免微孔板长时间暴露于空气中；

洗涤需彻底，防止交叉污染；

显色时间需严格控制。

质量控制：建议每批次实验设置复孔及空白对照。

技术参数

检测范围：通常为X-X ng/mL（具体参考标准曲线）。

灵敏度：≤X ng/mL。

批内/批间差：CV＜10%。

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