人附睾蛋白4(HE4)ELISA试剂盒

产品用途

本试剂盒用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中附睾蛋白4（HE4）的含量，适用于科学研究，不可用于临床诊断。

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。微孔板预包被纯化的人HE4抗体，形成固相抗体。加入样本或标准品后，HE4与固相抗体结合，再与HRP标记的检测抗体形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经洗涤后，加入底物TMB显色，在过氧化物酶催化下产生蓝色产物，酸化后转为黄色。450 nm波长下测定吸光度（OD值），样本中HE4浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线计算浓度。

试剂盒组成

预包被微孔板（48孔或96孔配置）

标准品（浓度梯度）

HRP标记检测抗体

TMB显色底物

终止液

洗涤缓冲液（浓缩液需稀释）

封板膜、密封袋

说明书

样本处理要求

血清：无菌采血后，3000 rpm离心10分钟，避免溶血或脂血干扰。

血浆：建议使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000 rpm离心30分钟取上清。

细胞上清液：离心去除颗粒物，3000 rpm离心10分钟。

所有样本需分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

操作步骤

将标准品及样本加入对应微孔，孵育后洗涤。

加入HRP标记抗体，孵育并洗涤。

加入TMB底物避光显色，终止反应后30分钟内测定OD值。

注意事项

试剂盒组分需按说明书保存，避免交叉污染。

显色时间及温度需严格控制，影响检测灵敏度。

若样本浓度超出标准曲线范围，需适当稀释后重测。

技术参数

检测范围：通常为15.6–1000 pg/mL。

灵敏度：≤5 pg/mL。

批内/批间变异系数：均<10%。

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