人白细胞介素6(IL-6)ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测样本中的IL-6。通过包被抗人IL-6单克隆抗体的微孔板捕获样本中的IL-6，再依次加入生物素标记的检测抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，形成复合物。加入底物TMB显色后，颜色的深浅与IL-6浓度成正比，通过450nm波长测定吸光度（OD值），结合标准曲线计算浓度。

适用范围

适用于人血清、血浆（EDTA/肝素/柠檬酸盐抗凝）、细胞培养上清液及其他生物体液中IL-6的检测。

试剂盒组成（2-8℃保存）

96孔配置：

预包被酶标板（96孔）

标准品（800pg/ml或20ng/瓶，需按说明书稀释）

生物素化抗体工作液

HRP标记链霉亲和素工作液

底物溶液（TMB）

终止液

浓缩洗涤液（需稀释使用）

样本稀释液

空白对照

48孔配置：

各组分用量减半，具体以实际包装为准。

样本处理

血清/血浆：采集后离心去除颗粒物，2-8℃保存48小时内检测；长期保存需-20℃或-70℃冻存，避免反复冻融。

细胞上清液：离心去除沉淀后直接检测或低温保存。

操作步骤

标准品稀释：按说明书梯度稀释至所需浓度。

加样：每孔加入标准品或样本，37℃孵育后洗涤。

抗体结合：依次加入生物素化抗体、酶结合物，孵育后洗涤。

显色：加入TMB底物，避光反应后终止。

检测：450nm波长读取OD值，绘制标准曲线并计算样本浓度。

注意事项

试剂使用前平衡至室温，避免交叉污染。

浓缩洗涤液需按比例稀释（如20×稀释为1×）。

显色时间需严格控制，避免过度反应。

性能参数

灵敏度：通常＜5pg/ml。

线性范围：15.6-1000pg/ml（覆盖常见生理及病理浓度）。

特异性：与人IL-6特异性结合，无交叉反应。

储存及有效期

未开封试剂盒2-8℃保存，有效期12个月；开封后组分需按标签要求保存（如酶标板需干燥密封）。

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