人基质金属蛋白酶12(MMP-12)ELISA试剂盒

概述

本试剂盒用于定量测定人血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶12 (MMP-12) 的含量。

实验原理 (Principle):

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (Sandwich ELISA)。

包被： 微孔板预先包被有纯化的抗人MMP-12抗体（固相抗体）。

加样与结合： 将样本或标准品加入微孔，其中的MMP-12抗原会与固相抗体结合。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人MMP-12抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物。

洗涤： 通过彻底洗涤去除未结合的物质。

显色： 加入底物四甲基联苯胺(TMB)。在HRP酶的催化下，TMB转化成蓝色产物。

终止与测定： 加入酸终止反应，溶液由蓝色转变为黄色。在酶标仪上于450 nm波长处测定吸光度(OD值)。

定量： 样本中MMP-12的浓度与OD值呈正相关。通过测定已知浓度的标准品并绘制标准曲线，即可计算出样本中的MMP-12含量。

样本类型 (Sample Type):

适用于检测人血清、血浆及相关液体样本。

样本要求

样本类型：血清、血浆、脑脊液、组织匀浆、细胞培养上清等。

样本体积：50~100 μL（建议离心去除颗粒物）。

保存条件：2~8℃短期保存，-20℃长期保存，避免反复冻融。

操作步骤

稀释：用标本稀释液处理样本及标准品。

加样：加入酶标板，37℃孵育1小时。

洗涤：用洗涤液洗板5次。

显色：加入TMB底物，避光反应15~30分钟。

终止：加入终止液，15分钟内测定OD值。

注意事项

有效期：6个月（2~8℃保存）。

重复性：板内变异系数＜10%，板间＜15%。

干扰因素：溶血、脂血或反复冻融样本可能影响结果。

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