大鼠白细胞介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒

商品属性

检测原理

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）

包被抗体：微孔板预包被抗大鼠IL-17A捕获抗体。

样本孵育：依次加入样本、标准品、HRP标记的检测抗体，温育后彻底洗涤。

显色反应：加入底物TMB，在过氧化物酶催化下产生蓝色→黄色（加酸终止）。

结果测定：450nm波长测定OD值，浓度与颜色深浅正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

样本处理要求

适用于血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆，处理方式如下：

| 样本类型 | 处理步骤 |

| 血清 | 无热原/内毒素试管收集，避免细胞刺激；3000 rpm离心10分钟分离血清 |

| 血浆 | EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝；3000 rpm离心30分钟取上清 |

| 细胞上清液| 3000 rpm离心10分钟去除颗粒 |

| 组织匀浆 | 生理盐水匀浆后，3000 rpm离心10分钟取上清 |

关键提示：组织样本需明确均质化方法，避免反复冻融影响蛋白活性。

试剂盒典型组成

预包被微孔板（48孔或96孔）

大鼠IL-17A标准品

HRP标记检测抗体

TMB显色底物液

终止液（酸性溶液）

洗涤缓冲液（浓缩液）

说明书 & 标准曲线坐标纸

操作注意事项

温育条件：需严格按说明书控制温度和时间（通常37℃, 30-60分钟）。

洗涤充分：避免非特异性结合导致假阳性，建议使用洗板机。

标准曲线：每次实验需同步绘制，建议复孔检测。

仪器校准：酶标仪需提前预热，450nm为主波长（参考波长570/630nm校正）。

数据解读示例

| 标准品浓度 (pg/mL) | 平均OD值 | 样本OD值 | 计算浓度 (pg/mL) |

| 0 | 0.05 | 0.32 | 85.2 |

| 50 | 0.18 | ... | ... |

| 100 | 0.35 | | |

注：超出标准曲线范围的样本需稀释后复测，结果乘以稀释倍数。

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