大鼠黄体激素(LH)elisa试剂盒

1. 检测原理

采用双抗体夹心ELISA技术，特异性识别大鼠LH的β亚基（15kDa）。预包被抗大鼠LH单抗（克隆号：518B7）捕获完整LH分子（28-32kDa），生物素标记的二抗通过链霉亲和素-HRP系统催化超敏化学发光底物，发光强度与LH浓度呈正相关。

 2. 核心组分

组分  规格  保存条件  关键特性

预包被板  96T  2-8℃（含干燥剂）  抗α亚基单抗包被

LH标准品  0-100ng/mL  -20℃  大鼠垂体提取物（NIDDK-rLH-RP-3）

化学发光底物  10mL  4℃（避光）  增强型鲁米诺配方

血清去激素剂  5mL  -20℃  消除内源性激素干扰

垂体提取缓冲液  15mL  4℃  含0.1% BSA的PBS

3. 性能参数

检测范围：0.1-25ng/mL（可扩展至100ng/mL）

灵敏度：0.03ng/mL（基于2SD空白值）

样本兼容性：

最佳：动情周期血清（避免溶血）

适用：垂体匀浆（1:1000稀释）、卵泡液

交叉反应：

大鼠LH：100%

小鼠LH：<0.1%

FSH/TSH：<0.01%

精密度：

批内CV：6.2-8.5%

批间CV：9.1-11.3%

4. 样本处理规范

4.1 血清采集

动情周期监测（阴道涂片确认）

上午9-11点心脏穿刺取血

室温凝固30分钟后离心（2000×g，15min）

4.2 垂体处理

快速分离腺垂体

加入1mL冷提取缓冲液

超声破碎（冰浴，10kHz，3×5秒）

12000×g离心20分钟（4℃）

4.3 特殊处理

卵泡液：需去除颗粒细胞（40μm滤网）

长期保存：-80℃分装（避免反复冻融）

5. 实验操作要点

标准曲线制备

梯度稀释：0、0.1、0.5、1、2.5、5、10、25ng/mL

复溶液：含5%去激素血清的PBS

关键步骤控制

孵育条件：37℃恒温摇床（200rpm）

洗板程序：自动洗板机（300μL/孔×6次）

信号读取：化学发光仪（积分时间1秒/孔）

质控标准

空白RLU值：≤500

最低检测限：≥0.1ng/mL

动情周期验证：发情期峰值≥15ng/mL

6. 主要应用方向

生殖内分泌研究：下丘脑-垂体-性腺轴调控

多囊卵巢模型：LH/FSH比值分析

衰老研究：更年期激素变化

药物评价：促性腺激素抑制剂筛选

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