大鼠核因子κB受体激活因子(RANk)elisa试剂盒

                                             大鼠核因子κB受体激活因子(RANk)elisa试剂盒
一、核心检测参数

检测靶标：大鼠RANK/TNFRSF11A（膜结合型及可溶型）

检测原理：三明治ELISA（双表位识别技术）

动态范围：15-2000 pg/mL（4.5个数量级）

灵敏度：<5 pg/mL（可检测单个破骨前体细胞表达）

样本兼容性：

破骨细胞培养上清（推荐）

骨髓单核细胞裂解液

骨组织匀浆（需胶原酶消化）

血清/血浆（检测sRANK）

 二、关键技术突破

抗体对特性：

捕获抗体：抗胞外区表位（Clone 12A5）

检测抗体：抗CRH结构域（HRP标记）

特异性控制：

不识别RANKL/OPG

与TRAIL受体无交叉反应

三、实验方案优化

破骨细胞诱导方案：

诱导条件 = RANKL(50ng/mL) + M-CSF(25ng/mL)

培养时间 = 5天（TRAP染色验证）

样本处理规范：

膜蛋白提取：

matlab

裂解缓冲液 = 含1% CHAPS的TBS

超速离心 = 100000×g,1h,4℃

血清处理：

采血后30min内离心（2000×g,15min）

避免使用肝素抗凝（影响RANKL结合）

四、质量控制系统

参数  验收标准

批内CV  ≤7%

批间CV  ≤12%

线性范围  85-115%

稳定性  24个月@-80℃

五、核心应用领域

骨代谢研究：

骨质疏松模型评估

骨转移瘤微环境分析

免疫调控：

树突状细胞成熟标志

乳腺发育研究

炎症性疾病：

类风湿关节炎滑膜破坏机制

牙周炎骨吸收监测

六、关键操作规范

特殊处理要求：

检测膜结合型需用含蛋白酶抑制剂的裂解液

避免样本反复冻融（≤2次）

信号检测系统：

TMB显色时间 = 10±0.5min（严格控制）

终止后检测窗口 = <15min

七、数据解读指南

生物学阈值：

样本类型  基础水平  激活水平

破骨细胞  50-200 pg/10细胞  >800 pg/10细胞

血清sRANK  100-400 pg/mL  >1000 pg/mL

联合检测方案：

必检组合：RANK + RANKL + OPG

关键比值：RANKL/RANK（骨吸收指数）

公司正在出售的产品：