大鼠Vitammin Delisa试剂盒

一、试剂盒基本信息

检测目标：大鼠25-羟基维生素D（25(OH)D）

生物学作用：维生素D是重要的脂溶性维生素，调节钙磷代谢、骨骼健康和免疫功能

检测形式：竞争性ELISA（酶联免疫吸附试验）

 样本类型：

血清（推荐）

血浆（肝素抗凝）

组织匀浆

检测范围：5-150 ng/mL

灵敏度：≤1.0 ng/mL

检测时间：约2.5小时

样本用量：25 μL/孔

二、实验原理

竞争结合：样本中的25(OH)D与酶标25(OH)D竞争结合抗体

洗涤：去除未结合物质

显色：加入TMB底物产生颜色反应

终止：酸终止反应

检测：450nm波长测定吸光度

三、试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96孔  2-8℃

25(OH)D标准品  6浓度梯度  -20℃

酶结合物  11mL  2-8℃

TMB底物液  11mL  2-8℃避光

终止液  6mL  室温

洗涤缓冲液  20×浓缩  室温

四、样本处理要求

血清/血浆：

室温凝固30分钟后离心（2000×g，15分钟）

避免溶血和脂血

组织样本：

按1:9（w/v）加入PBS匀浆

10000×g离心10分钟取上清

五、操作流程

标准品和样本加入对应孔（25μL/孔）

加入酶结合物（50μL/孔）

37℃孵育90分钟

洗板5次

加入TMB显色（100μL/孔）

室温避光显色15分钟

加入终止液（50μL/孔）

立即测定OD450值

六、注意事项

实验前所有试剂需平衡至室温

避免反复冻融标准品

严格控制显色时间

建议设置复孔

脂血样本需超速离心处理

七、应用领域

骨质疏松研究

维生素D代谢研究

肾脏疾病研究

免疫调节研究

营养学研究

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