大鼠IGFBP-2elisa试剂盒

1. 基本原理

双抗体夹心ELISA法：试剂盒采用特异性抗大鼠IGFBP-2抗体包被微孔板，样本中的IGFBP-2与抗体结合后，再加入酶标记的二抗，形成“抗体-抗原-酶标二抗”复合物。通过底物显色，颜色深浅与IGFBP-2浓度成正比。

2. 主要组分

预包被微孔板：抗大鼠IGFBP-2单克隆抗体固定于96孔板。

标准品：重组大鼠IGFBP-2（浓度梯度已知，用于绘制标准曲线）。

检测抗体：生物素或HRP标记的二抗。

显色底物：TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）或其他显色剂。

终止液（通常为硫酸溶液）。

洗涤缓冲液（如PBS-Tween）。

样本稀释液。

 3. 检测步骤

加样：标准品和待测样本加入微孔板。

孵育：37℃孵育使IGFBP-2与抗体结合。

洗涤：去除未结合物质。

加酶标二抗：形成复合物。

显色：加入底物后避光反应。

终止：加入终止液，颜色由蓝变黄。

检测：450 nm波长测OD值，计算浓度。

4. 技术参数

检测范围：通常为15.6–1000 pg/mL（不同品牌可能有差异）。

灵敏度：最低检测限可达<10 pg/mL。

特异性：仅识别大鼠IGFBP-2，不与其他IGFBP家族交叉反应。

重复性：板内、板间变异系数（CV）<10%。

5. 样本要求

类型：血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清。

处理：避免反复冻融，4℃短期保存，-20℃/-80℃长期保存。

稀释：高浓度样本需用稀释液调整至线性范围内。

6. 应用领域

代谢研究：IGFBP-2与肥胖、糖尿病相关。

生长发育：调控IGF-1的生物利用度。

肿瘤研究：某些癌症中IGFBP-2表达异常。

药物开发：评估药物对IGF系统的影响。

7. 注意事项

标准化操作：严格按说明书步骤进行，避免孔间污染。

质量控制：建议每板设置复孔和空白对照。

数据拟合：使用四参数逻辑（4-PL）曲线拟合标准品浓度。

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