大鼠CCL3(MIP-1α)elisa试剂盒

一、试剂盒核心信息

检测目标：大鼠CCL3（MIP-1α），一种CC趋化因子，由巨噬细胞、T细胞等分泌，参与炎症反应、免疫细胞招募（如单核细胞、中性粒细胞）。

方法学：双抗体夹心ELISA（主流方案），特异性检测游离CCL3（检测波长450 nm）。

适用样本：血清、血浆（肝素/EDTA抗凝）、支气管肺泡灌洗液（BALF）、组织匀浆（如肺、肝，需蛋白酶抑制剂）。

 二、关键组分与性能特点

1. 主要组分

预包被板：抗大鼠CCL3单抗包被的96孔板（部分品牌提供8联管格式，适合小样本量）。

标准品：重组大鼠CCL3（浓度梯度通常为15–2000 pg/mL，覆盖炎症模型中的高表达范围）。

检测系统：生物素-链霉亲和素-HRP放大系统，TMB显色（终止液为2M HSO）。

辅助试剂：样本稀释液（含载体蛋白，减少非特异性吸附）。

2. 性能参数

灵敏度：最低检测限可达5 pg/mL（超敏版本可至1 pg/mL）。

特异性：不与大鼠CCL2（MCP-1）、CCL4（MIP-1β）交叉反应。

稳定性：未开封试剂盒4℃保存有效期至2026年（标准品需-20℃以下保存）。

三、实验流程与优化建议

1. 简化步骤

① 样本预处理（离心去除颗粒物，BALF建议1:2稀释）→ ② 加样孵育（37℃ 2小时）→ ③ 洗涤→ ④ 加二抗（生物素标记，1小时）→ ⑤ 显色（避光20分钟）→ ⑥ 终止后读数（450 nm，参考570 nm校正）。

2. 关键注意事项

样本保存：-80℃保存可稳定6个月，避免反复冻融（建议分装）。

干扰排除：高浓度类风湿因子（RF）可能引起假阳性，可添加阻断剂。

标准曲线：推荐使用四参数逻辑（4PL）拟合，尤其关注低浓度区间（<50 pg/mL）。

四、应用场景

炎症性疾病研究：如急性肺损伤（ALI）、关节炎模型中CCL3的促炎作用。

感染免疫：细菌/病毒感染（如脓毒症、流感）中趋化因子风暴监测。

肿瘤微环境：评估CCL3在肿瘤相关巨噬细胞（TAM）招募中的作用。

五、时效性提示

技术更新：2025年部分品牌推出“多重检测版”，可同步检测CCL3/CCL4/CCL5，节省样本量。

替代方案：若需检测细胞内的CCL3，建议结合流式细胞术或Western Blot。

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