小鼠CCL3(MIP-1α)elisa试剂盒 新品

产品介绍：

小鼠CCL3（MIP-1α）ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠生物样本（如血清、血浆、细胞培养上清液等）中CCL3（巨噬细胞炎性蛋白-1α）浓度的免疫分析工具，广泛应用于免疫学、炎症研究和临床科研等领域。

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法进行检测：

抗小鼠CCL3的特异性抗体预包被于酶标板上。

样品或标准品中的CCL3与包被抗体结合，未结合成分被洗去。

加入生物素化的检测抗体，与已结合的CCL3形成免疫复合物。

随后加入酶标记的亲和素（如HRP），与生物素特异性结合。

加入显色底物（如TMB），在酶催化下产生颜色反应，颜色深浅与CCL3浓度成正比。

最后加入终止液，使用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中CCL3的浓度。

关键产品参数

检测范围：不同品牌有所差异，常见为7.8 pg/ml～500 pg/ml或4.1 pg/ml～1000 pg/ml。

灵敏度：最低可检测浓度通常低于10 pg/ml，部分可达1.95 pg/ml。

特异性：可检测天然和重组小鼠CCL3，与其他相关细胞因子无明显交叉反应。

样本类型：适用于血清、血浆（肝素、EDTA抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆等多种生物样本。

检测时间：通常2-3小时，部分快速试剂盒可在90分钟内完成。

操作步骤（简化）

试剂准备：将试剂盒组分平衡至室温，配制所需工作液。

加样：将标准品和待测样品加入相应孔中，建议做双孔检测以提高数据可靠性。

孵育：室温或37℃孵育，使抗原-抗体充分结合。

洗涤：洗板3-5次，去除未结合物质，手工或自动洗板均可。

加检测抗体：加入生物素化抗体，继续孵育。

再次洗涤，加入酶结合物（如SA-HRP），孵育。

显色与终止：加入显色底物（如TMB），避光显色，最后加入终止液。

读数与计算：在酶标仪450 nm处读取OD值，绘制标准曲线，计算样品浓度。

试剂盒组成（典型）

预包被抗体的96孔板（可拆条）

标准品（冻干粉，需复溶）

生物素化检测抗体

酶结合物（如HRP-亲和素）

洗涤液（浓缩型，需稀释）

显色底物（TMB）

终止液

样品稀释液

封板膜

说明书

注意事项

样本避免反复冻融，建议分装保存

严格避免交叉污染，使用一次性吸头

洗涤过程要充分，避免背景偏高

显色过程避光，终止后及时读数

不同批号试剂不可混用

试剂盒应在2-8℃避光保存。

主要优点缺点

维度  优势 (Pros) 劣势 (Cons)

检测性能   灵敏度极高，特异性强，结果准确  可能存在交叉反应，易受干扰物影响

操作体验   流程标准化，无需昂贵设备，适合高通量检测   步骤多且繁琐，耗时较长，对操作技巧有要求

经济成本   适合大批量样本检测，长期看性价比尚可   单次试剂成本较高，且不同批次可能存在差异

应用范围   可检测血清、血浆、细胞上清等多种样本   对样本质量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的产品：

试剂与样本准备阶段

温度平衡（最容易被忽视的点）

 操作： 从冰箱取出的试剂盒（包括标准品、酶标试剂、样品等）必须在室温（18-25℃）下平衡 30 分钟。

后果： 冷试剂直接使用会导致孔内温差，产生冷凝水或非特异性背景，严重影响 OD 值。

试剂配制

洗涤液： 浓缩洗涤液如果在低温下保存可能会有结晶析出。配制时必须确保结晶完全溶解并混匀。

现用现配： 酶标试剂和显色液（如 TMB）对光和热敏感，建议在使用前配制工作液，避免失效。

样本处理

避免溶血： 血清样本如果发生溶血（红细胞破裂），会释放过氧化物酶，导致假阳性或背景过高。

离心去杂质： 血液或细胞上清样本在加样前最好进行离心，去除沉淀和悬浮物，防止堵塞孔底或干扰读数。

稀释倍数： 如果样本浓度过高，超出标准曲线范围，必须进行预实验确定稀释倍数。计算结果时记得乘以稀释倍数。