大鼠血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒

概述：

大鼠血管内皮生长因子(VEGF)ELISA试剂盒是一种基于双抗体夹心法的免疫检测工具，用于定量分析大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的VEGF浓度‌该技术通过抗原-抗体特异性结合及酶标显色反应实现高灵敏度检测，广泛应用于肿瘤血管生成研究、药物开发及病理机制探索‌。

检测原理：

采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）：

微孔板预包被大鼠VEGF特异性抗体；

依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体形成复合物；

经TMB显色后，450nm波长测定吸光度（OD值），浓度与显色深度呈正比。

检测原理‌：

‌双抗体夹心法‌：

固相抗体（包被于微孔板）捕获样本中的VEGF抗原‌。

加入酶标抗体（HRP标记）与VEGF另一表位结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物‌。

通过TMB底物显色（蓝色→黄色），450nm波长测定吸光度（OD值），浓度与显色深度正相关‌。

‌操作流程‌：

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一、样本准备‌：

‌血清/血浆‌：避免溶血，离心后保存（2-8℃短期，-20℃长期）‌。

‌细胞上清‌：离心去除颗粒物，避免反复冻融‌。

‌二、实验步骤‌：

‌包被抗体‌：微孔板预包被抗大鼠VEGF抗体‌。

‌孵育‌：依次加入样本、标准品、酶标抗体，37℃温育‌。

‌洗涤‌：去除未结合物质，减少背景干扰‌。

‌显色‌：TMB底物反应后，终止液终止，酶标仪读数‌。

‌三、数据分析‌：

通过标准曲线（已知浓度VEGF的OD值）计算样本浓度‌。

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