小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa试剂盒

                                             小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)elisa试剂盒
一、检测目标与生物学意义

1. 目标分子

MCP-1（CCL2）是CC趋化因子家族成员，由巨噬细胞、内皮细胞等分泌，通过结合CCR2受体招募单核细胞/巨噬细胞至炎症或肿瘤部位，是慢性炎症、动脉粥样硬化及肿瘤微环境调控的关键分子。

2. 检测价值

炎症模型：评估类风湿关节炎（CIA模型）或神经炎症（阿尔茨海默病模型）的巨噬细胞浸润程度。

肿瘤研究：肿瘤相关巨噬细胞（TAM）浸润的量化标志物（如Lewis肺癌模型）。

代谢疾病：肥胖小鼠脂肪组织中MCP-1水平与胰岛素抵抗正相关。

二、试剂盒核心参数

参数  技术细节

检测原理  双抗体夹心ELISA（抗小鼠MCP-1单抗对）

灵敏度  2–5 pg/mL（高敏版本可达1 pg/mL）

检测范围  10–2000 pg/mL（覆盖病理浓度）

样本类型  血清、血浆（EDTA）、组织匀浆、细胞上清

交叉反应  不与MCP-3/CCL7或MIP-1α/CCL3交叉

检测时间  3小时（含封闭步骤减少非特异性结合）

三、实验操作关键点

样本处理

组织匀浆：建议加入含蛋白酶抑制剂的PBS（1:10 w/v匀浆），离心（12,000×g, 15分钟）取上清。

避免反复冻融：-80℃分装保存（冻融≤3次），4℃短期保存≤48小时。

标准化流程

步骤1：标准品/样本与预包被抗体孵育（室温, 2小时）。

步骤2：生物素化二抗→链霉亲和素-HRP→TMB显色（450 nm检测，570 nm校正）。

数据分析：推荐5参数拟合（5PL）算法，低浓度样本（<20 pg/mL）建议复测。

干扰控制

高脂样本：脂肪组织匀浆需超速离心（100,000×g, 1小时）去除脂蛋白。

四、典型模型数据参考

小鼠模型  MCP-1浓度范围  关联表型

LPS诱导全身炎症  血清: 500–3000 pg/mL  巨噬细胞活化标志物CD68↑

ApoE-/-动脉粥样硬化  主动脉组织: 200–1500 pg/mL  斑块面积↑

4T1乳腺癌模型  肿瘤组织: 1000–5000 pg/mL  TAM比例↑

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