小鼠白介素17/17A(IL-17/17A)elisa试剂盒

一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠IL-17A单抗（如大鼠IgG1），特异性结合IL-17A的C端表位（检测范围4–500 pg/mL）。

信号放大：HRP标记的二抗与超敏化学发光底物联用（灵敏度达1 pg/mL），可检测天然及重组IL-17A。

抗干扰设计：含IL-17F阻断肽（交叉反应率＜0.5%），避免与IL-17家族其他成员（如IL-17B/C）交叉结合。

 动态范围优化

覆盖基础水平（健康小鼠血清＜5 pg/mL）至炎症状态（如EAE模型小鼠血清＞200 pg/mL）。

二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗IL-17A（氨基酸残基50-158）抗体固定化（批间差＜6%）

标准品  重组小鼠IL-17A（0、4、16、64、250、500 pg/mL，含0.1% BSA冻干保护剂）

适用样本  血清（首选）、血浆（EDTA抗凝）、脾细胞培养上清（需离心去除细胞碎片）

特殊添加剂  含0.01% Thimerosal防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、应用场景与科研价值

自身免疫病研究

实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）：发病期IL-17A＞150 pg/mL提示Th17细胞活化。

类风湿关节炎模型：关节滑液中IL-17A水平与骨侵蚀程度正相关。

感染与炎症

白色念珠菌感染模型中，IL-17A通过中性粒细胞招募介导宿主防御（＞100 pg/mL）。

肿瘤免疫

IL-17A在结直肠癌微环境中双向调控肿瘤进展（需联合IFN-γ检测）。

四、操作规范与质控要点

样本处理

细胞培养上清需去除死细胞（0.22 μm滤膜过滤），避免假阳性。

避免反复冻融（IL-17A易形成同源二聚体）。

实验关键

温育条件：37℃避光1小时，洗涤液需含0.1% Tween-20（pH 7.2–7.6）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（回收率85–115%）。

五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测低至1 pg/mL的IL-17A  无法区分IL-17A单体与二聚体形式

特异性  与IL-17F交叉反应＜0.5%  高浓度样本需验证稀释线性（＞500 pg/mL）

通量  适配高通量检测（如自动化工作站）  组织匀浆需优化裂解缓冲液

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