小鼠白细胞介素17A(IL-17A)ELISA试剂盒

商品属性 

基本原理

检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (Sandwich ELISA)。

流程：

微孔板预先包被抗小鼠IL-17A的单克隆抗体（捕获抗体）。

加入待测样本（如血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆）和小鼠IL-17A标准品。

加入生物素或HRP标记的抗小鼠IL-17A的另一株单克隆抗体（检测抗体）。

温育后彻底洗涤。

加入底物（通常为TMB）。

酶催化底物显色（无色→蓝色→加酸终止后变为黄色）。

颜色深浅与样本中IL-17A的浓度呈正相关。

检测与计算：在450nm波长下读取吸光度（OD值）。根据标准品浓度和对应的OD值绘制标准曲线，利用曲线方程计算样品中IL-17A的浓度。

样品收集、处理及保存

血清： 用无热原、无内毒素的采血管收集血液，避免溶血或剧烈震荡。室温凝固后，1000 - 3000×g 离心10-20分钟，小心分离上层澄清血清。

血浆： 使用EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂收集血液。采血后30分钟内于1000 - 3000×g 离心10-30分钟取上清（血浆）。

细胞培养上清： 收集细胞培养液，立即1000 - 3000×g 离心10-20分钟去除细胞及碎片，取上清。

组织匀浆： 将组织剪碎，加入适量预冷的PBS（或其他特定提取缓冲液），用匀浆器或超声处理制成匀浆。10000×g左右离心10-20分钟，取上清液。

保存：

新鲜制备的样品最好立即检测。

如需短期保存，可置于2-8℃冷藏（通常建议不超过48小时）。

如需长期保存，应分装后冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。检测前需恢复至室温并完全融化后，再次离心去除沉淀。

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