人白介素17A(IL-17A)elisa试剂盒

一、核心检测原理与技术优势

双抗体夹心ELISA技术

采用高亲和力配对抗体：

捕获抗体：预包被于96孔板的抗IL-17A单抗（如小鼠IgG1），特异性结合样本中的IL-17A（检测范围1–500 pg/mL）。

检测抗体：生物素或HRP标记的二抗（如兔源多抗），通过TMB显色实现信号放大（灵敏度达0.5 pg/mL）。

创新设计：部分试剂盒添加阻断剂（如HBR），可消除异嗜性抗体干扰，提高检测特异性。

 动态检测范围优化

标准品梯度覆盖生理（健康人血清＜10 pg/mL）与病理浓度（银屑病/类风湿关节炎患者可达200 pg/mL以上）。

二、关键组分与样本处理规范

组分  技术说明

预包被微孔板  经BSA封闭处理，批间差＜8%（96孔/板，可拆分为12×8条）

标准品  重组人IL-17A（0、5、20、50、100、200、500 pg/mL，冻干粉需复溶）

适用样本  血清（推荐）、血浆（肝素抗凝）、细胞上清（需离心）、组织匀浆（含蛋白酶抑制剂）

特殊添加剂  含0.05% Proclin 300防腐剂，2–8℃保存有效期12个月

三、临床应用与科研价值解析

自身免疫疾病诊断

银屑病：皮损局部IL-17A水平可达血清的10–100倍，是生物制剂（如司库奇尤单抗）疗效监测关键指标。

强直性脊柱炎：活动期患者血清IL-17A显著升高（＞50 pg/mL）。

肿瘤免疫微环境研究

在结直肠癌、乳腺癌中，IL-17A通过调控Th17细胞影响肿瘤进展（需与IL-17F区分检测）。

感染与炎症反应

真菌感染（如念珠菌病）患者IL-17A水平与免疫防御功能正相关。

四、操作要点与质控标准

关键实验步骤

样本稀释：建议初始1:2稀释（高浓度样本需梯度验证）。

温育条件：37℃避光孵育1小时，严格控时（±5分钟）。

干扰因素控制

质控要求

每板需包含：空白孔、标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（回收率85–115%）。

五、技术优势与局限性对比

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测低至0.5 pg/mL的微量IL-17A  无法区分IL-17A同源二聚体与IL-17A/F异源二聚体

特异性  与IL-17B/C/D/E/F交叉反应＜0.01%  血清中可溶性受体（如IL-17RA）可能影响检测

适用性  适配自动化平台（如BioTek酶标仪）  组织样本需优化裂解缓冲液（避免蛋白降解）

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