小鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa试剂盒

                                             小鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa试剂盒
一、检测原理与技术特性

双抗体夹心ELISA技术

捕获抗体：微孔板预包被抗小鼠IgE单抗（如大鼠IgG2a），靶向IgE的FcεRI结合域（检测范围0.5–100 ng/mL）。

信号放大：生物素-链霉亲和素-HRP三级放大系统，搭配超敏TMB显色（灵敏度达0.2 ng/mL）。

抗干扰设计：含非特异性IgG阻断剂（如小鼠血清白蛋白），降低与其他免疫球蛋白交叉反应（＜0.1%）。

动态范围优化

覆盖基础水平（健康小鼠血清0.5–2 ng/mL）至过敏状态（如OVA致敏模型小鼠＞50 ng/mL）。

 二、核心组分与样本要求

组分  技术参数

预包被96孔板  抗IgE（ε链特异性）抗体固定化（批间差＜7%）

标准品  纯化小鼠IgE（0、1、5、20、50、100 ng/mL，含0.1% BSA冻干保护剂）

适用样本  血清（首选）、血浆（肝素抗凝）、BALF（需离心澄清）

特殊添加剂  含0.05% ?防腐剂，2–8℃保存有效期18个月

三、应用场景与科研价值

过敏性疾病研究

哮喘模型：卵白蛋白（OVA）致敏小鼠血清IgE＞30 ng/mL提示Th2免疫应答激活。

食物过敏：花生蛋白激发后IgE水平与肥大细胞脱颗粒程度正相关。

寄生虫感染

旋毛虫感染小鼠IgE升高（＞20 ng/mL）反映蠕虫特异性免疫应答。

免疫调控机制

IgE通过FcεRI受体介导的Ⅰ型超敏反应机制解析。

四、操作规范与质控要点

样本处理

避免溶血（红细胞释放蛋白酶降解IgE），采集后30分钟内离心（4℃，3000×g）。

BALF样本需浓缩5倍（超滤离心）以提高检出率。

实验关键

温育条件：37℃避光45分钟，洗涤液需含0.05% Tween-20（pH 7.4）。

质控标准

每板需含：标准曲线（R2≥0.99）、高/低值质控（CV＜8%）。

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五、性能比较与注意事项

特性  优势  局限性

灵敏度  可检测游离IgE及IgE-抗原复合物  无法区分不同抗原特异性IgE

特异性  与IgG/IgM交叉反应＜0.1%  高脂血样本需超速离心（＞5000×g）

通量  适配全自动平台  组织样本需验证提取方法