硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测定试剂盒/分光光度法/48样

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

TPX 属于过氧化物酶家族，在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用，功能与GPX 类似，也是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。TPX 普遍存在于各种生物体内，如酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫、细菌和古细菌，在进化上高度保守。TPX 与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。TPX 的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。

测定原理：

TPX 催化 H2O2 氧化二硫苏糖醇（DTT），H2O2  的吸收波长为 240nm ，通过测定 240nm 吸光度的下降速率，即可计算出 TPX 活性。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL 石英比色皿和蒸馏水。

TPX 测定操作：
1. 分光光度计预热 30min ，调节波长到 240 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）水浴预热 30 min。

3. 取 1mL 石英比色皿，加入 20 μ L 上清液，900 μ L 试剂二，80 μ L 试剂三，迅速混匀后于 240 nm 测定 10 s 和 130 s 吸光度，记为 A1 和 A2。

注 意：
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。