人胸腺基质淋巴生成素(TSLP)elisa试剂盒

                                             人胸腺基质淋巴生成素(TSLP)elisa试剂盒
概述

人胸腺基质淋巴生成素（Thymic Stromal Lymphopoietin, TSLP）是一种关键的2型细胞因子，在过敏性炎症（如哮喘、特应性皮炎）和免疫调节中发挥核心作用。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，专用于定量检测人血清、血浆、细胞上清或支气管肺泡灌洗液（BALF）中的TSLP蛋白水平，适用于免疫学和过敏性疾病研究。

1. 检测原理（双抗体夹心ELISA）

预包被捕获抗体：微孔板包被抗人TSLP单克隆抗体（如抗TSLP表位：aa 63-80）。

样本结合：TSLP蛋白与捕获抗体特异性结合。

检测抗体孵育：加入生物素或HRP标记的抗TSLP二抗（识别不同表位）。

 信号放大与显色：链霉亲和素-HRP催化TMB显色（蓝色→黄色）。

定量分析：450nm测OD值，TSLP浓度与吸光度成正比。

2. 试剂盒组成

组分  说明

预包被微孔板  96孔（可拆卸），包被抗TSLP单抗（如克隆#5G12）。

TSLP标准品  重组人TSLP蛋白（0、7.8、15.6、31.3、62.5、125、250、500 pg/mL）。

检测抗体  生物素标记的抗TSLP二抗（如克隆#12G8）。

TMB显色液  避光保存，现用现配。

终止液  1M H?SO?。

洗涤缓冲液  20×浓缩Tris-HCl缓冲液（含0.1% Tween-20）。

样本稀释液  含BSA的PBS，减少非特异性结合。

3. 适用样本及处理

血清/血浆（EDTA抗凝）：离心（1000×g, 10min）去除血小板。

BALF：离心（400×g, 10min）去除细胞。

细胞上清（如PBMC培养）：离心（300×g, 5min）去除碎片。

稳定性：2-8℃保存≤48小时，长期需-80℃（避免反复冻融）。

4. 操作步骤（简化版）

加样：标准品/样本加入微孔板 → 37℃孵育90分钟。

洗涤：洗板5次，去除未结合物。

加检测抗体：孵育60分钟（37℃）。

信号放大：加链霉亲和素-HRP → 孵育30分钟。

显色：加TMB → 避光反应20分钟。

终止与检测：加终止液，450nm读值（参考570nm扣背景）。

5. 应用领域

过敏性疾病：哮喘、特应性皮炎（AD）的Th2炎症标志物。

自身免疫病：类风湿关节炎（RA）滑膜液TSLP水平升高。

肿瘤微环境：TSLP促进乳腺癌免疫逃逸。

药物研发：抗TSLP抗体疗效监测。

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