RWPE-1人前列腺正常细胞

RWPE-1人前列腺正常细胞

 细胞特性:

1） 来源：前列腺正常细胞

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x106  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

细胞系背景与核心特征

来源与生物学意义

起源：通过慢病毒介导的SV40大T抗原永生化技术，从一名非肿瘤男性前列腺组织中获得，保留正常前列腺上皮细胞的极性结构和功能。

关键特性：

非致瘤性：软琼脂中不形成克隆，裸鼠体内不成瘤；

前列腺特异性标志物：表达PSA（前列腺特异性抗原）、角蛋白8/18（CK8/18）及雄激素受体（AR）；

基因组稳定性：二倍体核型，无常见前列腺癌驱动突变（如TMPRSS2-ERG融合）。

研究价值

作为前列腺癌研究的金标准正常对照，适用于致癌物毒性测试、前列腺炎症模型及癌变机制研究。

核心研究方向与前沿应用

（1）前列腺疾病建模

慢性炎症研究：

用IL-6/TNF-α刺激模拟前列腺炎微环境，分析NF-κB通路激活对屏障功能的破坏（Journal of Urology 2025）。

致癌物筛查：

测试双酚A（BPA）或镉暴露对上皮-间质转化（EMT）的诱导作用。

（2）前列腺癌机制研究

癌变对比模型：

与恶性细胞（如LNCaP、PC-3）对比转录组（RNA-seq）或甲基化差异（如GSTP1启动子甲基化）；

类器官构建：

在基质胶中与成纤维细胞共培养，模拟前列腺腺体结构。

（3）药物开发

化疗药物毒性评估：

测试多西他赛对正常上皮细胞的杀伤阈值；

天然化合物保护作用：

如番茄红素对氧化应激损伤的缓解效应。

培养条件与质控要点

培养基：

Keratinocyte-SFM（无血清） + 5 ng/mL EGF + 50 μg/mL BPE（垂体提取物），或改用DMEM/F12 + 5% FBS简化培养。

传代参数：

贴壁生长，胰酶消化时间≤2分钟（建议用0.05%胰酶-EDTA）；

传代比例1:3，每周2次，避免过度融合诱导衰老。

质控标准：

每3个月检测SV40大T抗原表达（避免沉默导致生长停滞）；

STR鉴定参考ATCC CRL-11609；

定期验证AR功能（如双氢睾酮刺激实验）

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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