MIA-PACA-2人胰腺癌细胞

MIA-PACA-2人胰腺癌细胞

细胞特性:

1） 来源：胰腺

2） 形态：上皮细胞样，半贴壁生长

3） 3）含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5） 用途：仅供科研使用。

1. 细胞基础特性

来源与背景：

源自一位56岁白人男性胰腺癌患者的原发肿瘤组织（1975年建系），属于 低分化导管腺癌 模型，具有典型的胰腺癌突变谱（如KRAS G12C、TP53缺失）。

形态与标志物：上皮样贴壁生长，高表达CA19-9（糖类抗原）和CEA（癌胚抗原），部分保留腺泡细胞特征（如胰蛋白酶原表达）。

培养条件：

培养基：DMEM（高糖） + 10%胎牛血清 + 1%非必需氨基酸（NEAA）。

倍增时间：约30-40小时，传代比例建议1:3~1:5（胰酶消化时间控制在2-3分钟）。

2. 核心研究应用

（1）胰腺癌机制研究

KRAS信号通路：常用于探究KRAS突变下游效应（如MAPK/ERK激活）及靶向耐药机制（如针对KRAS G12C抑制剂Sotorasib的敏感性测试）。

代谢重编程：高糖酵解活性（Warburg效应），适用于研究抑制剂（如2-脱氧葡萄糖）或线粒体靶向药物。

（2）药物开发与筛选

化疗耐药模型：对吉西他滨（Gemcitabine）敏感性中等（IC50约10-50 nM），可用于联合用药研究（如与nab-紫杉醇或PARP抑制剂联用）。

免疫治疗研究：通过共培养T细胞或巨噬细胞，评估PD-1/PD-L1阻断剂效果（MIA-PACA-2组成性表达PD-L1）。

（3）转移与微环境

侵袭性分析：Transwell实验显示中等侵袭能力，适合研究EMT（如Snail/ZEB1调控）或基质金属蛋白酶（MMP-2/9）的作用。

类器官模型：与胰腺星状细胞（PSCs）共培养可模拟肿瘤纤维化微环境。

3. 实验注意事项

支原体风险：该细胞系易污染，需定期检测（推荐PCR法）。

形态变异：长期传代可能导致部分细胞呈现梭形（间质化），建议使用低代次（<20代）冻存株。

冻存复苏：存活率约70%-80%，建议添加10% DMSO冻存液并逐步降温。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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