OAR-L1绵羊肺成纤维细胞（原代永生化）

OAR-L1绵羊肺成纤维细胞（原代永生化）

 细胞特性:

该细胞系来源于一雌性绵羊的肺组织。1990年由中国科学院昆明细胞库建立。

细胞特性

1） 来源：绵羊肺

2） 形态：成纤维细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途：仅供科研使用。

1细胞背景与特性

来源

源绵羊（Oviaries）肺组织，通永生化处理（如SV40大T抗原或hTERT转导）获得持续增殖能力。

细胞类型：成纤维细胞样，具有典型梭形形态和胞外基质分泌功能。

关键特性

永生化标志物：

SV4T抗原或端粒酶（hTERT）稳定表达（需通过PCR/WB验证）。

功能特性：

保留成纤维细胞功能：胶原（I/III型）分泌、伤口修复模型构建。

可用肺纤维化、病毒感染（如绵羊肺炎支原体）研究。

物种特异性：适用于反刍动物（羊、牛）比较医学研究。

2培养条件与操作

培养基

基础培养基：DMEM（高糖）RPMI-1640。

补充物：

10-15胎牛血清（FBS），1非必需氨基酸（NEAA）。

成纤维细胞生长添加剂（如ng/mbFGF，可选）。

注意：避免频繁换液（成纤维细胞对机械刺激敏感）。

培养环境

37°C、5CO，湿度饱和。

传代比例：1:1:4（80汇合时传代，过度生长易老化）。

消化方法

0.25胰蛋白酶-EDT消1-分钟（成纤维细胞易卷曲脱落）。

冻存与复苏

冻存液：90FB10DMSO，密5×101×10cells/mL。

复苏后：贴壁较慢，建议静置48小时再换液。

3主要应用

肺部疾病模型

肺纤维化：通过TGF-β1诱导胶原沉积，模拟病理过程。

支原体感染：研究绵羊肺炎支原体（Mycoplasmovipneumoniae）的宿主互作。

兽医学研究

评估绵羊呼吸道病毒（如副流感病毒3型）的复制机制。

组织工程

作为3D生物打印或胶原支架的细胞来源。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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