RF/6A猴脉络膜-视网膜内皮细胞

RF/6A猴脉络膜-视网膜内皮细胞

 细胞特性:

RF/6A细胞在早期自发转化并已传代540次以上；电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。高代次的RF/6A细胞用作滋养层以增强贴壁，转接能力和供养眼色素层黑素细胞。

细胞特性

1） 来源：恒河猴   脉络膜；视网膜 内皮细胞 正常

2） 形态：上皮细胞样；贴壁细胞

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

培养条件与实验要点

培养基：

基础：DMEM/F110FB1%内皮细胞生长添加剂（如ECGS）；

传代：0.25%胰酶消化（2分钟），传代比例1:2至1:3，避免过度汇合（>90%会降低屏障功能）。

注意事项：

需使用明胶（0.1%）包被培养皿以增强贴附；

定期检Angiopoietin-1/表达以评估细胞稳态。

主要研究应用

眼科疾病模型：

糖尿病视网膜病变（DR）中血管渗漏机制研究；

2025年新应用：靶VEGF-的基因疗法对脉络膜新生血管（CNV）的抑制效果（IOV2025.05）。

药物筛选：

抗血管生成药物（如阿柏西普）的体外效价测试；

纳米载体穿透血-视网膜屏障的效率评估。

局限性及替代选择

局限性：

永生化可能弱化原代细胞的屏障特性；

猴源细胞与人视网膜内皮存在种属差异（如VEGFR2表达量）。

替代细胞系：

ARPE-19（人视网膜色素上皮细胞）：侧重上皮-内皮互作研究；

HUVEC（人脐静脉内皮细胞）：通用内皮模型但缺乏视网膜特异性。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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