RF/6A 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系

RF/6A是从恒河猴视网膜中分离得到的内皮细胞系。可用于心血管疾病的研究。这个细胞株在早期自发转化并已传代540次以上。 电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。 高代次的细胞用作滋养层以增强贴壁，转接能力和供养眼色素层黑素细胞。

细胞在本库通过支原体检测阴性（可供检测报告）。
细菌检测结果：阴性；真菌检测结果：阴性
在本库通过STR种属污染鉴定：该株细胞猕猴细胞，没有人源及其他物种细胞污染。 RF/6A细胞取自64日孕期胎猴脉络膜-视网膜，细胞表达因子VIII、纤维连接蛋白基因。RF/6A细胞在早期自发转化并已传代540次以上，电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。高代次的RF/6A细胞用作滋养层以增强贴壁、转接能力和供养眼色素层黑素细胞。EXPASY细胞库显示，细胞属性可能被误认，虽然最初被认为是一种内皮细胞系，但已证明缺乏这种细胞类型的功能和转录组学特征。 1） 来源：恒河猴 脉络膜；视网膜 内皮细胞 正常
2） 形态：上皮细胞样；贴壁细胞 RF/6A细胞在早期自发转化并已传代540次以上，电镜下观察到Weibel-Palade颗粒。高代次的RF/6A细胞用作滋养层以增强贴壁、转接能力和供养眼色素层黑素细胞。EXPASY细胞库显示，细胞属性可能被误认，虽然最初被认为是一种内皮细胞系，但已证明缺乏这种细胞类型的功能和转录组学特征。 1.尽量吸干净T25瓶原培养基；2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；4.将培养瓶放入37度培养箱消化；5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 冻存RF6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 猕猴 脉络膜；视网膜；内皮细胞；正常 贴壁细胞 64FD;Sex unspecified 上皮细胞， 贴壁生长

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

RF6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞系细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

自发永生化细胞 正常的