人结直肠腺癌细胞+LUC；SW620+LUC

                                                           人结直肠腺癌细胞+LUC；SW620+LUC
产品信息：

人结直肠腺癌细胞SW620+LUC是一种经过荧光素酶（Luciferase, 简称LUC）转染的结直肠癌细胞系，常用于肿瘤生物学研究，尤其是体内成像和肿瘤转移机制研究。以下是关于SW620+LUC细胞的详细说明、培养操作和特性：

细胞来源与特性**   SW620细胞源自一位51岁男性白人结直肠腺癌转移淋巴结组织，SW620+LUC是SW620细胞经过荧光素酶基因转染的稳定株，具有高致瘤性和转移潜能，可在活体成像中通过生物发光监测肿瘤生长和转移

培养基   L-15培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%双抗（P/S）

培养条件   37℃、空气95%+CO 5%、饱和湿度环境

传代方法   细胞密度达80%-90%时传代，用胰酶消化，按1:2至1:4比例分瓶

冻存与复苏   冻存用含10% DMSO的无血清冻存液，液氮保存；复苏时37℃水浴快速解冻，离心后重悬接种

应用   肿瘤生长监测、转移机制研究、药物疗效评估等

培养操作步骤

复苏细胞：

从液氮中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中快速解冻。

将细胞悬液转移至含5-6mL完全培养基的离心管中，100 0rpm离心5分钟，弃去上清液。

用新鲜培养基重悬细胞，接种到预热的培养瓶中，37℃、5% CO培养箱中培养过夜。

细胞传代：

当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打使细胞悬浮。

1000rpm离心5分钟，弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，按1:2至1:4的比例分装到新的培养瓶中，补加新鲜培养基，继续培养。

细胞冻存：

选择生长状态良好的细胞，收集细胞悬液，1000rpm离心5分钟，弃去上清液。

用无血清冻存液重悬细胞，分装至冻存管中，逐步降温后存于液氮罐或-80℃冰箱。

注意事项

无菌操作：整个培养过程需在无菌条件下进行，避免污染。

细胞观察：定期在显微镜下观察细胞形态和密度，及时换液和传代。

培养基更换：每隔2-3天更换一次培养基，以维持细胞的健康状态。

安全防护：操作时需佩戴防护装备，如手套、口罩和护目镜，避免接触有害物质。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

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具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。