人肾小管上皮细胞；HKC (STR)

产品信息：

人肾小管上皮细胞（HKC）是一种来源于人肾小管的上皮细胞系，常用于肾脏相关研究，如肾小管功能、肾损伤机制及药物毒性研究等。

细胞特性

种属与组织来源：人源，肾小管组织。

形态与生长：上皮细胞样，贴壁生长，呈多角形或铺路石样排列。

功能特征：表达肾小管上皮细胞标志物（如碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶等），具有肾小管上皮细胞的转运和代谢功能。

应用领域：肾小管功能研究、肾损伤机制研究、药物毒性筛选等。

生物安全等级：1级。

培养条件与操作

培养基：DMEM/F12培养基+10%胎牛血清（FBS）+1%青霉素-链霉素，37℃，5% CO₂。

复苏：

冻存管37℃水浴快速解冻，加入5mL预热完全培养基混匀。

1000rpm离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬细胞。

接种至T25培养瓶，补充6-8mL培养基，37℃培养过夜。

传代：

细胞密度达80%-90%时进行传代。

弃旧培养基，PBS润洗1-2次，加入1-2mL 0.25%胰酶-EDTA溶液，37℃消化1-2分钟（镜下观察细胞变圆脱落）。

加完全培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液。

离心收集细胞后按1:2至1:3比例分瓶，补充新鲜培养基继续培养。

冻存：

细胞生长良好时收集，离心后弃上清。

用无血清冻存液（或90%FBS+10%DMSO）重悬细胞，调整密度至1×10⁶/mL以上。

分装冻存管，使用程序降温盒逐步降温（先置于-20℃1.5小时，再转入-80℃冰箱），24小时后可转入液氮罐长期保存。

注意事项

无菌操作：全程严格无菌操作，避免污染。

细胞状态监控：定期在显微镜下观察细胞形态和密度，及时换液和传代。

运输与保存：细胞运输过程中注意温度控制，收到细胞后尽快复苏培养，避免长时间放置。

HKC细胞作为研究肾小管功能的重要模型，其培养和操作需严格遵循规范，以确保实验结果的可靠性和可重复性。

培养操作要点：

基础培养基选择：分为天然培养基、合成培养基（如DMEM、RPMI 1640）和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。

培养条件设置：

温度：多数人和哺乳动物细胞为36-37℃，昆虫细胞为27℃。

pH值：多数哺乳动物细胞为7.4，昆虫细胞为6.2。

CO₂浓度：通常维持5-7% CO₂，多数细胞适合5% CO₂气氛。

渗透压：控制在260-320mOsm/kg为宜。

功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

注意事项与应用

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。

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