"HKC:人胚肾小管上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SKO3细胞类似产品::143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞
NCI-H187细胞类似产品::RCK8细胞、Y 1细胞、HEK-293H细胞
PaTu8988s细胞类似产品::Hs863T细胞、HCEC-B4G12细胞、HPBALL细胞
MSTO-211 H细胞类似产品::H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:胚胎;肾小管;上皮细胞
HKC:人胚肾小管上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SK.OV.3细胞类似产品::HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
HEK 293-EBNA细胞类似产品::HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞
HOS TE85细胞类似产品::Clone M-3细胞、MDA-1386细胞、Pro-Lec1.3C细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HKC:人胚肾小管上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
LLCMK2细胞类似产品::L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞
Th17细胞类似产品::MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
P 3 HR 1细胞类似产品::SK-MEL-31细胞、Monomac-1细胞、NCI-HUT-460细胞
NCIH548细胞类似产品::COLO 679细胞、HGC27细胞、NCI-H838细胞
DHL-16细胞类似产品::MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
Hs 606细胞类似产品::L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
NCIH2172细胞类似产品::MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
NCI-747细胞类似产品::Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞
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H-1623细胞类似产品::HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞
HUC-1细胞类似产品::NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
NIH:OVCAR3细胞类似产品::NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
NCIH1666细胞类似产品::MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
Dx5细胞类似产品::NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞
Panc-8_13细胞类似产品::HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞
GM00637I细胞类似产品::NCIH292细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、HS-940-T细胞
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HCC0095细胞类似产品::Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
MKN74细胞类似产品::AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞类似产品::NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
HT 144细胞类似产品::CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
Tb 1-Lu细胞类似产品::BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞
Human Epidermoid carcinoma #2细胞类似产品::HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
CAL27细胞类似产品::MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
HKC:人胚肾小管上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Cloudman S91 melanoma细胞类似产品::COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞
OVCAR 433细胞类似产品::COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞
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CEMC1细胞类似产品::DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞
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B-3细胞类似产品::COLO-738细胞、Hs578Bst细胞、H-2452细胞
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TCC Sup细胞类似产品::Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
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HCC1187细胞类似产品::ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞
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NOZAWA细胞类似产品::ME180细胞、NCI-SNU-878细胞、HepaRG细胞
HS578细胞类似产品::CAMA-1细胞、SCCVII/St细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞
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T-24细胞类似产品::SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
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T98细胞类似产品::SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
SMMC7721细胞类似产品::CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
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