SK-MEL-28人黑素瘤细胞 新品

                                                            SK-MEL-28人黑素瘤细胞
产品信息：

SK-MEL-28是一种人恶性黑色素瘤细胞系，常用于癌症研究，尤其是黑色素瘤的分子机制、药物筛选和信号通路研究。以下是其介绍及培养操作的核心要点：

细胞特性：

来源：SK-MEL-28细胞系来源于一名51岁男性恶性黑色素瘤患者的皮肤组织。

形态：多边形，贴壁生长，具有轻度色素沉着。

生长特性：细胞贴壁生长，增殖较快，常用于研究黑色素瘤的侵袭、转移及治疗。

基因特征：携带B-Raf(V600E)突变，N-Ras为野生型，这一特征使其成为研究MAPK信号通路的重要模型。

培养条件：

培养基：通常使用MEM或RPMI-1640培养基，补充10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素。

培养环境：37℃、5% CO2培养箱。

传代比例：1:2至1:3，每2-3天传代一次，当细胞密度达到80%-90%时进行传代。

培养操作步骤：

复苏：

从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻。

将细胞悬液转移至含有预热培养基的离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清。

加入新鲜培养基重悬细胞，转移至培养瓶中，37℃培养箱中培养过夜，次日观察细胞状态。

传代：

弃去旧培养基，用PBS轻轻润洗细胞1-2次。

加入胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞，显微镜下观察细胞变圆并脱落时，加入完全培养基终止消化。

轻轻吹打细胞，使其完全脱落，离心收集细胞，用新鲜培养基重悬后按适当比例分至新的培养瓶中。

冻存：

收集对数生长期细胞，用冻存液（含10%DMSO的完全培养基）重悬细胞。

分装至冻存管中，按照标准冻存程序（如程序降温盒或逐步降温法）降至液氮温度后长期保存。

培养条件与操作

培养基及环境：

基础培养基：DMEM高糖培养基补充10%胎牛血清（FBS）和1%双抗（P/S）。

培养环境：37°C、5% CO?、湿度70%-80%的培养箱。

传代培养（细胞密度达80%-90%时）：

消化：弃培养液，PBS轻洗后加入0.25%胰酶（含EDTA），37°C消化1-3分钟（显微镜下观察细胞变圆、间隙增大即终止）。

终止与重悬：加入完全培养基终止消化，轻柔吹打成单细胞悬液，1000rpm离心3-5分钟，弃上清后重悬于新培养基。

分瓶比例：推荐1:2至1:4（具体视细胞生长速度调整），接种至新T25瓶并补足培养基。

冻存操作：

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（或无血清冻存液）。

程序：细胞沉淀重悬于冻存液，分装至冻存管后放入-80°C过夜，次日转入液氮保存。

复苏方法：

37°C水浴快速解冻，转移至含预热培养基的离心管，100 0rpm离心3-5分钟，重悬后接种于新培养瓶。

细胞的功能特性

细胞具备多种基本功能：

物质运输：通过被动运输（自由扩散、协助扩散）和主动运输实现物质跨膜转运

能量转换：以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能

信息传递：通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导

增殖分裂：原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖

分化与死亡：细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

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