LUDLU1人肺鳞状细胞癌细胞

LUDLU1人肺鳞状细胞癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性，72岁

组织来源:肺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

细胞特性：

组织来源

源自人肺鳞状细胞癌（SCC）组织，经病理确诊为鳞癌亚型（通过p40/CK5/6阳性表达确认）

具有典型鳞癌特征：角化珠形成倾向、细胞间桥结构（电镜下可见）

分子特征

常见突变谱（需验证）：

TP53突变（>80%肺鳞癌）

CDKN2A（p16）缺失

PI3K/AKT通路激活（如PTEN缺失）

潜在治疗靶点：

PD-L1表达（免疫治疗）

FGFR1扩增（靶向治疗）

培养条件：

参数  推荐条件  关键注意事项

培养基  DMEM高糖 + 10% FBS  添加1mM丙酮酸钠（增强代谢）

贴底特性  强贴壁性，易成岛状生长  传代前需充分消化（见下文）

传代比例  1:3~1:6（80%融合时）  过度生长会导致分化异常

消化方案  0.25%胰酶+0.02% EDTA（37°C, 5-7min）  镜下观察细胞回缩变圆立即终止消化

3. 关键操作技术

特殊处理（针对鳞癌细胞特性）

消化优化：

预铺1-2μg/cm2胶原蛋白（增强贴壁）

消化后加入含血清培养基立即中和（鳞癌细胞对胰酶敏感）

防聚集措施：

传代时用**细胞筛（40μm）**过滤去除未消化团块

可短暂低速离心（800rpm, 3min）促进单细胞化

冻存与复苏

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO + 5%葡萄糖（额外保护）

复苏后处理：

首次换液在24小时后（减少脱落细胞损失）

初始接种密度建议2×10 cells/cm2

4. 研究应用方向

靶向治疗开发

FGFR抑制剂测试（如厄达替尼/Erdafitinib，需先验证FGFR1扩增）

PI3K/AKT通路抑制（如Buparlisib联合化疗）

免疫治疗研究

PD-1抗体敏感性：通过流式检测PD-L1动态表达（IFN-γ诱导后）

肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）共培养：评估免疫细胞杀伤效应

转移机制探索

3D培养模型：

Matrigel中形成肿瘤球（模拟原位微环境）

检测MMP-2/9分泌（明胶酶谱法）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。