T-47D人乳腺癌细胞 新品

产品信息：

T-47D是一种人乳腺导管癌细胞系，常用于乳腺癌相关研究，如药物筛选、信号通路研究及肿瘤生物学机制探索等。

细胞特性

来源：从54岁女性乳腺导管癌胸腔积液中分离建立。

形态：上皮样细胞，贴壁生长。

特性：雌激素受体阳性（ER+），表达WNT7B癌基因，常用于激素依赖性乳腺癌研究。

培养条件

培养基：RPMI-1640培养基 + 10%胎牛血清（FBS）+ 1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境：37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。

传代比例：1:2至1:4，具体视细胞生长密度而定。

换液频率：每2-3天更换一次新鲜培养基，或根据细胞密度和培养基颜色变化及时更换。

传代步骤

消化：弃去旧培养基，用PBS润洗细胞后加入胰酶（0.25% Trypsin-EDTA），37℃孵育至细胞脱落（通常1-2分钟）。

终止消化：加入含血清的完全培养基终止胰酶作用，轻轻吹打使细胞分散。

离心重悬：将细胞悬液转移至离心管，1000 rpm离心5分钟，弃上清后用新鲜培养基重悬细胞。

传代：按适当比例分装至新的培养瓶中，补足培养基后继续培养。

冻存与复苏

冻存：细胞密度达80%-90%时，用含10%DMSO的冻存液重悬细胞，分装至冻存管，按标准程序降温后储存于液氮中。

复苏：从液氮中取出冻存管，迅速投入37℃水浴中解冻，待完全融化后转移至离心管，加入预热的培养基，离心后重悬细胞并接种到培养瓶中。

注意事项

操作全程需在无菌条件下进行，建议在生物安全柜中操作。

细胞复苏后首次培养建议观察24-48小时，确保细胞状态稳定后再进行后续实验。

根据实验需求，可调整培养基成分或添加特定因子（如激素）以模拟特定生理或病理条件。

主要应用特点

疫苗生产：全球85%以上口蹄疫灭活疫苗由其生产，可高效增殖口蹄疫病毒、狂犬病病毒等病原体。

病毒研究：对口蹄疫病毒、脑心肌炎病毒等敏感，用于病毒扩增及载体开发。

重组蛋白表达：可作为转染宿主，高效表达凝血因子、病毒样颗粒等重组蛋白。

质量控制：需防范支原体及细菌污染，定期检测确保细胞纯净，生物安全等级为1级。

操作步骤：

细胞复苏：

将冻存管在37℃水浴中快速解冻，加入预热的完全培养基混匀，离心后弃上清，用新鲜培养基重悬细胞，接种至培养瓶中，37℃培养过夜。

细胞传代：

弃去旧培养基，用PBS润洗细胞，加入胰酶消化液消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落，加入完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞脱壁并分散，离心收集细胞后重悬于新鲜培养基中，按适当比例分瓶传代。

细胞冻存：

收集对数生长期细胞，胰酶消化后离心收集，用冻存液（90%培养基+10%DMSO）重悬，分装至冻存管中，使用程序降温盒逐步降温，-80℃过夜后转入液氮保存。

注意事项：

支原体检测：定期进行支原体检测，确保细胞无污染。

细胞状态：密切观察细胞形态和生长状态，及时调整培养条件。

功能特点

细胞具备多种基本功能：

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运；以ATP为核心载体，通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能；通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导；原核细胞采用二分裂，真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖；细胞可进行程序性死亡（凋亡），并在多细胞生物中实现分化形成不同组织

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