基因组DNA提取试剂盒（吸附柱法） 新品

基因组DNA提取试剂盒（吸附柱法）

简介：

基因组DNA提取试剂盒（吸附柱法）基于硅胶膜特异性吸附DNA的原理，通过细胞裂解、蛋白消化、DNA结合与纯化等步骤实现高效提取。

核心原理

试剂盒利用高盐低pH环境促使DNA与硅胶膜结合，经漂洗去除蛋白质及杂质，最后在低盐高pH条件下洗脱获得高纯度基因组DNA。该方法无需酚氯仿等有毒试剂，提取的DNA纯度和完整度更高，适用于PCR、qPCR、NGS等分子生物学实验。

操作流程

样本处理

血液样本：若体积＜200μl，用缓冲液补足；若＞200μl，需先用红细胞裂解液处理（12,000rpm离心20sec），沉淀加200μl缓冲液重悬。

细菌样本：取1-5ml培养液离心收集菌体，加200μl裂解液重悬。

组织样本：需先剪碎并加入裂解液消化（56℃水浴30-60min），充分裂解后转移至吸附柱。

裂解与消化

加入蛋白酶K（20μl，10-20mg/ml）和结合液（如200-220μl），70℃孵育10-60min至溶液清亮。

可选RNase A处理（10mg/ml）降解RNA，室温放置5-10min。

DNA结合与纯化

加入等体积无水乙醇（如200-220μl），混匀后转移至吸附柱（12,000rpm离心30-60sec），弃废液。

漂洗：先后用抑制物去除液（500μl）和漂洗液（600μl，需加乙醇）各洗涤两次。

空离心：12,000rpm离心2min，室温晾干吸附柱以去除乙醇残留。

洗脱

吸附膜中央滴加50-200μl预热洗脱液（如65℃水浴），室温静置2-5min，12,000rpm离心2min收集DNA。

可将洗脱液重新加入吸附柱二次洗脱以提高得率。

关键注意事项

试剂准备：漂洗液需按标签加入无水乙醇，首次使用前务必检查。

样本保存：避免反复冻融，否则DNA片段断裂且得率下降。

下游应用：洗脱液pH需7.0-8.5（如用ddH2O），DNA产物保存于-20℃。

操作规范：所有离心步骤均使用台式离心机，室温下进行。

应用与优势

该试剂盒适用于全血、组织、细胞、细菌等多种样本，提取的DNA可用于PCR、酶切、基因测序等实验。其优势包括操作简便、纯度高、兼容自动化设备，适合科研、临床诊断及法医学检测。

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