脯氨酸脱氢酶(PRODH)测试盒

脯氨酸脱氢酶（ Proline dehydrogenase，ProDH)试剂盒说明书

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

ProDH是存在于线粒体内的催化脯氨酸降解的关键酶。脯氨酸是分布最广泛的一种渗透物质，在胁迫条件下很多植物可以通过增加合成、减少降解而在体内累积大量脯氨酸，降低ProDH活性对于调节渗透平衡、防止渗透胁迫对植物造成伤害、清除自由基、保护细胞结构具有重要意义。

测定原理：

利用异硫氰酸甲酯检测ProDH催化的脱氢反应，600nm处吸光值的吸光值的变化反映酶活性的高低。

试剂三临用前加入4ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；

试剂四临用前加入4ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；

自备仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

粗酶液提取：

按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆，1500g 4℃离心15min，取上清液于一支新的EP管中，加入一滴试剂一（用10μl的枪头加入），涡旋混匀，冰浴放置30min后，16000g 4℃离心20min，取上清置冰上待测。

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