人趋化因子CCL3样蛋白1(CCL3L1)ELISA试剂盒 新品

检测方法：竞争法酶联免疫吸附试验（ELISA）

规格：96T/48T

检测范围：78.125–5000 pg/mL

最低检测限：32 pg/mL

适用样本：血清、血浆、组织匀浆、腹水、细胞培养上清

保存条件：2–8℃冷藏，避免光照或冷冻。

实验原理

试剂盒采用竞争法检测样本中CCL3L1含量。预包被抗体与样本中的CCL3L1及生物素标记抗原竞争结合，形成固相免疫复合物。洗涤后加入亲和素-HRP，催化TMB显色，450 nm波长下测定吸光度（OD值），OD值与样本中CCL3L1浓度呈负相关。

操作步骤

试剂准备

所有试剂使用前需平衡至室温（20–25℃），避免反复冻融。

配制洗涤液：使用干净塑料容器，按说明书比例稀释浓缩洗涤液。

加样与孵育

标准品孔：加入50 μL系列浓度标准品（建议梯度稀释）。

样本孔：加入50 μL待测样本（血清/血浆需离心去除杂质）。

每孔加入50 μL生物素标记抗原，37℃孵育30分钟。

洗涤

弃去液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后拍干，重复3次。

酶结合反应

每孔加入100 μL亲和素-HRP，37℃孵育30分钟，再次洗涤。

显色与终止

每孔加入90 μL TMB底物（避光操作），37℃避光显色15分钟。

加入50 μL终止液（2M硫酸），立即测定OD值（450 nm）。

注意事项

样本处理：避免溶血或反复冻融；组织样本需匀浆后离心取上清。

板条保存：未使用的板条需密封放回4℃保存，避免受潮。

加样精度：使用一次性吸头，避免交叉污染；加样时避免触碰孔壁。

显色控制：底物A需避免挥发，底物B需避光；终止后10分钟内完成读数。

质控要求：建议每板设置复孔及空白对照，CV值应≤15%。

结果计算

以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，通过四参数拟合方程计算样本浓度。

性能参数

精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<12%。

回收率：85–115%（添加标准品验证）。

特异性：不与CCL3、CCL4等其他趋化因子交叉反应。

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