大鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒

产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），专为大鼠血清、血浆、细胞上清液及组织匀浆等样本中穿孔素1（PRF1）的定量检测设计。PRF1是细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）和自然杀伤（NK）细胞分泌的关键效应蛋白，通过形成靶细胞膜穿孔通道介导细胞凋亡，在免疫防御和肿瘤免疫监视中发挥核心作用。

检测原理

预包被微孔板：孔内预包被抗大鼠PRF1单克隆抗体。

样本孵育：样本中的PRF1与固相抗体结合，洗涤后加入生物素标记的检测抗体。

信号放大：加入链霉亲和素-HRP复合物，与生物素化抗体结合，洗涤后加入TMB显色底物。

结果测定：在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算PRF1浓度。

技术参数

检测范围：0.156–10 ng/mL（标准曲线范围可定制）。

灵敏度：≤0.05 ng/mL（最低检测限）。

特异性：不与大鼠其他穿孔素家族蛋白（如PRF2）交叉反应。

样本类型：血清（建议稀释5倍）、血浆（EDTA/肝素抗凝）、细胞上清液（离心去除沉淀）、组织匀浆（PBS缓冲液提取）。

重复性：板内变异系数（CV）<8%，板间CV<10%。

试剂盒组分

预包被96孔板（可拆卸条）

PRF1标准品（冻干粉，6浓度梯度）

生物素标记检测抗体

HRP标记链霉亲和素

TMB显色液、终止液

洗涤缓冲液（20×浓缩液）

封板膜、说明书

实验流程

标准品复溶：用标准品稀释液溶解冻干粉，梯度稀释。

加样孵育：每孔加样100 μL，37℃孵育90分钟。

洗涤：洗板5次，拍干。

检测抗体孵育：加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。

显色与终止：加入TMB显色15分钟，终止后30分钟内读数。

注意事项

科研用途：仅限体外研究，不可用于临床诊断。

样本处理：避免反复冻融；溶血或脂血样本需离心澄清。

保存条件：未开封试剂盒4℃保存6个月，标准品-20℃保存。

应用领域

免疫学研究：评估CTL/NK细胞活性。

肿瘤模型：监测免疫治疗中PRF1的动态变化。

感染性疾病：分析病毒逃逸机制与PRF1表达关联。

质量控制

每批次试剂盒均通过人源化PRF1阳性对照验证，确保批间一致性。

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