LS174T人结肠癌细胞

                                                                             LS174T人结肠癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:58 岁，女性

组织来源:结肠

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25 或 1 mL 冻存管

培养条件:EMEM+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3 传代, 2-3 天传 1 代

1. 细胞系基本信息

名称：LS174T

来源：人结肠腺癌细胞，分离自一名50岁男性结肠腺癌患者的肝脏转移灶，具有高度分化特征，常被用于研究结肠癌的黏液分泌、侵袭及转移机制。

特性：

组织学类型：黏液腺癌（Mucinous Adenocarcinoma），高表达黏蛋白（如MUC2、MUC5AC）。

基因突变谱：

常见突变：APC突变（导致WNT通路激活）、KRAS突变（常见于G12D或G12V位点）、TP53突变（功能失活）。

其他特征：可能携带PIK3CA突变、SMAD4缺失或MSI-L（微卫星低不稳定性）。

免疫表型：

低表达PD-L1（通常为MSI-L型），TMB（肿瘤突变负荷）较低，对免疫检查点抑制剂响应有限。

高表达黏蛋白相关基因（如MUC2、MUC5AC），可能影响肿瘤微环境（TME）中的免疫细胞浸润。

功能特性：

黏液分泌能力强，适合研究黏液腺癌的生物学行为。

侵袭性中等，迁移能力较强，可用于转移机制研究。

2. 结肠癌背景与LS174T的关联

结肠癌分子分型：

CMS分型（Consensus Molecular Subtypes）：

CMS2（经典型）：WNT通路激活，上皮特征，预后较好。

CMS3（代谢型）：代谢异常（如糖酵解增强、脂肪酸合成增加），KRAS突变。

CMS4（间质型）：EMT（上皮-间质转化）特征，TGF-β通路激活，预后较差。

LS174T的分子亚型：

可能属于CMS2型（经典型），因其携带APC突变、KRAS突变和WNT通路激活。

黏液分泌特征可能使其在CMS分型中具有独特性，需结合基因表达谱进一步验证。

临床相关性：

黏液腺癌占结肠癌的约10%-15%，预后通常较差，对化疗响应较低。

LS174T作为黏液腺癌细胞模型，可用于研究黏液分泌对肿瘤进展的影响及潜在治疗靶点。

3. LS174T在科研中的应用

药物筛选与耐药研究：

化疗药物：测试5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂、伊立替康的敏感性，研究黏液分泌对药物渗透的影响。

靶向药物：

EGFR抑制剂：对KRAS突变型结肠癌（如LS174T）通常无效，但可用于验证耐药机制。

MEK抑制剂：针对KRAS突变后的MAPK通路激活，如曲美替尼（Trametinib）。

PI3K-AKT抑制剂：针对PIK3CA突变，如Alpelisib。

耐药机制：

黏液层可能形成物理屏障，阻碍药物渗透，导致化疗耐药。

KRAS突变导致的MAPK通路持续激活，可能引发EGFR抑制剂耐药。

分子机制研究：

WNT通路：APC突变导致β-catenin核积累，激活下游基因（如c-MYC、CCND1）。

KRAS信号：KRAS突变激活RAS-RAF-MEK-ERK通路，促进增殖和存活。

黏液分泌调控：研究MUC2、MUC5AC等黏蛋白的表达调控机制，探索干预靶点。

3D培养与类器官模型：

结合3D培养技术，模拟黏液腺癌的微环境，研究黏液层对肿瘤细胞侵袭和转移的影响。

通过类器官模型验证药物疗效，推动个性化治疗。

4. 实验注意事项

细胞培养条件：

培养基：通常使用EMEM（Eagle's Minimum Essential Medium）或DMEM，含10%-20%胎牛血清（FBS）和抗生素（如青霉素、链霉素）。

形态特征：细胞呈上皮样，贴壁生长，黏液分泌能力强，培养液中可能形成黏液团块。

污染检测：定期检测支原体污染，避免实验误差。

基因突变验证：

通过PCR或测序确认APC、KRAS、TP53突变状态，确保细胞系身份正确。

功能实验设计：

结合黏液分泌实验（如PAS染色、黏蛋白免疫组化），验证LS174T的黏液腺癌特征。

通过Transwell实验研究黏液层对肿瘤细胞侵袭的影响

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。