产品名称:人结直肠腺癌细胞LS174T
传代方法 | 次建议1:2传代 | 冻存条件 | 无血清冻存液(货号:C7001) |
细胞描述 | 本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 |
培养备注 | 用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养 |
人结直肠腺癌细胞LS174T收到后处理
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
人结直肠腺癌细胞LS174T操作步骤
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
三、细胞冻存:(注:无血清冻存液冻存细胞的方法请参考我司官网货号:C7001)
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3、用适量的冻存液重悬细胞,并放置于冻存管中;
4、先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃
人结直肠腺癌细胞LS174T部分相关细胞如下:
YS1171 kasumi1 人红白血病细胞kasumi1
YS1172 KB 人口腔表皮癌细胞KB
YS1173 KG1A 人急性髓性白血病细胞KG1A
YS1174 KGN 人卵巢颗粒细胞瘤细胞KGN
YS1175 KLE 人子宫内膜癌细胞KLE
YS1176 KNS89 人脑胶质细胞瘤细胞KNS89
YS1177 KU812 人外周血嗜碱性白血病细胞KU812
YS1178 kyse150 人食管鳞状细胞癌kyse150
YS1179 kyse30 人食道癌细胞kyse30
YS1180 kyse410 人食道鳞状细胞癌kyse410
YS1181 LCC 人喉癌细胞LCC
YS1182 Li7 人肝癌细胞Li7
YS1183 LLN 人喉癌淋巴结转移细胞LLNLLN
YS1184 LN229 人胶质瘤细胞LN229
YS1185 LNCaPcloneFGC 人前列腺癌细胞LNCaPcloneFGC
YS1186 LOVO 人结直肠癌细胞LOVO
YS1187 LOVO5/Fu 人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株LOVO5/Fu
YS1188 LOVO/LUC 人结直肠癌细胞LOVO/LUC
YS1189 LS174T 人结直肠腺癌细胞LS174T
YS1190 Ls180 人结直肠癌细胞Ls180
YS1191 Ls513 人结直肠癌细胞Ls513
YS1192 LX2 人肝星状细胞系LX2
YS1193 LX2/GFP 人肝星形细胞LX2/GFP
YS1194 Mahlavu 人肝癌细胞Mahlavu
YS1195 MCF10A 人乳腺上皮细胞MCF10A
YS1196 MCF7 人乳腺癌细胞(非三阴)Her2阴性,ER阳性。MCF7
YS1197 MCF7/LUC 人乳腺癌细胞+LUC(非三阴)Her2阴性,ER阳性。MCF7/LUC
YS1198 MDAKB2 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAKB2
YS1199 MDAMB157 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAMB157
YS1200 MDAMB231 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAMB231
YS1201 MDAMB231/GFP 人乳腺癌细胞+GFP(三阴性)MDAMB231/GFP
YS1202 MDAMB231/LUC 人乳腺癌细胞+LUC(三阴性)MDAMB231/LUC
YS1203 MDAMB361 人乳腺癌细胞(非三阴)MDAMB361
YS1204 MDAMB415 人乳腺癌细胞(非三阴)MDAMB415
YS1205 MDAMB435S 人黑素瘤细胞MDAMB435S
YS1206 MDAMB436 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAMB436
YS1207 MDAMB453 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAMB453
YS1208 MDAMB468 人乳腺癌细胞(三阴性)MDAMB468
YS1209 ME180 人子宫颈表皮癌细胞ME180
YS1210 MEG01 人巨核细胞白血病细胞MEG01
YS1211 MET5A 人膜间皮细胞MET5A
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