SNU475人肝癌细胞

                                                                             SNU475人肝癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:43岁，亚洲男性

组织来源:肝

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI-1640 Medium +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系背景与分子特性：

基础特征

来源与分型

源自韩国患者的肝细胞癌（HCC）组织，病理分型为 中分化肝细胞癌，典型标志物 AFP+、GPC-3+，可能携带亚洲人群高频突变（如 TP53 R249S，与黄曲霉毒素暴露相关）。

关键驱动变异：

graph TB

A[分子特征] --> B[高频突变: TP53(60%)]

A --> C[信号通路异常: Wnt/β-catenin(CTNNB1野生型)]

A --> D[表观遗传: TERT启动子突变(80%)]

临床相关性

预后模型：高表达 PD-L1 和 VEGF，适合免疫-靶向联合治疗研究（如阿替利珠单抗+贝伐珠单抗）。

代谢特征：糖酵解活性强（HK2高表达），适合研究代谢干预策略。

2. 核心科研应用：

转化研究方向

耐药机制

研究索拉非尼耐药中 EGFR/MET通路 的代偿性激活

测试新型药物组合（如卡博替尼+免疫检查点抑制剂）

免疫微环境

通过单细胞测序解析 CD8+ T细胞耗竭 与 Treg浸润 的调控网络

前沿模型构建

类器官-血管化模型

与内皮细胞共培养模拟HCC血窦结构，评估抗血管生成药物渗透性

外泌体功能研究

分离SNU-475外泌体（含miR-221），研究其促转移机制

3. 培养规范与质控：

关键参数

项目  标准化条件  优化建议

培养基  DMEM高糖 + 10% FBS  添加1% GlutaMAX（防代谢应激）

传代方法  0.25%胰酶+0.02% EDTA  消化时间≤2分钟（防EMT）

冻存方案  10% DMSO+20% FBS  程序降温速率-1℃/min

质控重点  每月TP53突变验证  STR比对KCLB数据库

常见问题对策

细胞贴壁差：改用胶原蛋白包被培养瓶（Ⅰ型，5μg/cm2）

支原体污染：使用Plasmocin（25μg/mL）预防性处理

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。