"SNU-475:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长，生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不HAO，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HSKMC细胞类似产品：：C8166-CD4细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、SIRC细胞
SUP-T1细胞类似产品：：N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
C3H/10T1/2 clone 8细胞类似产品：：TE 32细胞、PIG1细胞、RPMI-8402细胞
NUGC-4细胞类似产品：：WSU-DLCL-2细胞、CF-1 MEF细胞、Be-Wo细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU-475:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
CHG5细胞类似产品：：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
HPDLF细胞类似产品：：HCC2935细胞、MLO-Y4细胞、J774 A.1细胞
NCIH358细胞类似产品：：NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SNU-475:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。
ECC1细胞类似产品：：MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
NIH:OVCAR4细胞类似产品：：Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
HTR-8/SVneo细胞类似产品：：DV-90细胞、hCMEC/D3细胞、PC-12细胞
TE11细胞类似产品：：Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
PSN1细胞类似产品：：SVEC4-10细胞、TOV21G细胞、DiFi细胞
YH-13细胞类似产品：：HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞
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N1E-115细胞类似产品：：87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞
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WiDr/S细胞类似产品：：WERI-Rb1细胞、MDCK (NBL-2)细胞、Hs-343-T细胞
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Walker256-TC细胞类似产品：：WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
NCI-H322T细胞类似产品：：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
VSC4.1细胞类似产品：：UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
SNU-398细胞类似产品：：NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞
OCIAML4细胞类似产品：：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
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BCECs细胞类似产品：：PANC403细胞、MCF-7/ADR-RES细胞、MDA-MB 468细胞
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CFSC-2G细胞类似产品：：H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞
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AC16 [Human hybrid]细胞类似产品：：SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
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SJ-RH30细胞类似产品：：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞
SJ-RH30细胞类似产品：：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞
NG-108-15细胞类似产品：：TC-1 [Mouse lung]细胞、CL11细胞、BNL CL.2细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞类似产品：：A375SM细胞、RL-95-2细胞、IB-RS-2细胞
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KYSE70细胞类似产品：：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
JVM-2细胞类似产品：：3T3-L1 ad细胞、Caco-2 BBe细胞、SaOS-2细胞
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SNU-475:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
FHs74 Int细胞类似产品：：HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
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OCI-Ly 10细胞类似产品：：IEC 18细胞、HLE B-3细胞、WILL-2细胞
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LS411N细胞类似产品：：H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
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