NCIH2122人非小细胞肺癌细胞

细胞属性：

 细胞特性

种属来源:人

性别年龄:46岁，女性

组织来源:肺

生长特性:半贴壁半悬浮

细胞形态:圆形细胞和上皮样混合的

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

基础档案

组织来源：肺腺癌（ⅢB期）患者胸膜转移灶

病理确认：实体型腺癌（TTF-1+/Napsin A+）

认证信息：

STR分型匹配ATCC CRL-5985（需每6个月验证）

支原体检测：每月MycoAlert（阈值RLU≤1.0）

分子特征谱

1. 关键驱动变异

基因  变异类型  临床意义

KRAS  G12C突变  对Sotorasib敏感（IC50=38nM）

TP53  Y220C（构象突变）  导致p53功能失活

STK11  Q37*无义突变  mTOR通路激活

PD-L1  22C3 TPS=25%  免疫治疗潜在响应

2. 蛋白表达特征

mermaid

title 免疫组化标记

"TTF-1" : 85

"Napsin A" : 70

"CK7" : 95

"PD-L1" : 25

培养标准化方案

优化培养体系

参数  标准方案  3D培养方案

基础培养基  RPMI-1640 + 10% FBS  Matrigel（30%）+ 2% BME

关键添加剂  1mM丙酮酸钠  10nM EGF + 5μg/mL胰岛素

传代方法  0.05%胰酶+0.02% EDTA  机械解离法

冻存密度  2×10 cells/vial  类器官冻存试剂盒

质控要点

形态监控：

正常：多边形上皮样（异常梭形提示EMT）

处理：TGF-β抑制剂（SB431542, 10μM）

支原体防控：

预防性使用Plasmocin（5μg/mL, 每3代）

PCR检测（引物：5'-GGCGAATGGGTGAGTAAC-3'）

研究应用平台

1. KRAS靶向研究

药物敏感性（72h CTG法）：

药物  IC50 (nM)  机制

Sotorasib  38±5  KRAS G12C抑制剂

Adagrasib  29±4  KRAS G12C共价抑制剂

Trametinib  15±2  MEK抑制剂

耐药模型构建：

# 渐进式Sotorasib耐药诱导

for cycle in range(10):

expose_to(Sotorasib, dose=IC50*(1.5**cycle))

validate(AXL磷酸化 by Western)

2. 类器官培养

培养条件：

基质胶：Matrigel（50%）+ Collagen I（30%）

细胞因子：FGF10（50ng/mL）+ Wnt3a（20ng/mL）

特征：形成腺泡结构（PAS染色阳性）

3. 免疫共培养

CD8+T细胞杀伤实验：

效靶比10:1（Anti-CD3/CD28激活）

抗PD-1处理增效35%（LDH释放法）

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