LNCaP clone FGC (LNCaP 人前列腺癌细胞

LNCaP clone FGC (LNCaP  人前列腺癌细胞

 基本特性:

种属来源:人

性别年龄:男性

组织来源:前列腺

生长特性:贴壁生长

细胞形态:上皮细胞样

细胞规格:1 X 106cells/T25或1 mL冻存管

培养条件:RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

冻存条件:90% FBS + 10% DMSO

传代方法:1:3传代, 2-3天传1代

1. 细胞系基础特征

来源与分类

组织来源：人前列腺癌淋巴结转移灶（雄激素敏感型腺癌）

亚型特性：FGC亚克隆保留经典LNCaP特征，但可能表现更高遗传稳定性

分子标签：

雄激素受体（AR）：T877A突变（组成型激活，对去势治疗敏感）

标志物：PSA表达阳性，NKX3.1部分缺失

基因组特征：PTEN缺失（常见），ERG融合阴性

研究价值

雄激素依赖模型：研究去势抵抗性前列腺癌（CRPC）转化的黄金标准

药物开发平台：适用于第二代抗雄激素药物（如恩杂鲁胺）的耐药机制研究

2. 核心研究方向

方向一：激素治疗响应

雄激素调控实验：

双氢睾酮（DHT 1-10nM）刺激后检测PSA分泌（ELISA法）

AR拮抗剂（比卡鲁胺）剂量响应曲线（IC50通常0.1-1μM）

CRPC模拟：

长期低雄激素培养（含10% charcoal-stripped FBS）诱导耐药

方向二：代谢重编程

脂代谢研究：

通过Seahorse分析仪检测脂肪酸氧化（FAO）速率

靶向ACLY（三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶）的抑制剂测试

类器官模型：

Matrigel中培养需添加R1881（合成雄激素 1nM）

3. 培养与质控

培养体系

培养基：RPMI-1640 + 10% FBS（常规）或5% CSS-FBS（去雄激素实验）

传代要点：

消化时间：0.25%胰酶-EDTA 3分钟（过度消化易损伤AR活性）

传代比例：1:3至1:4（密度低于80%时操作）

质量控制

必检项目：

STR分型（比对ATCC CRL-1740标准）

AR突变验证（Sanger测序确认T877A）

支原体检测

4. 实验设计优化

动物模型

皮下成瘤：

接种量：2×10 cells/鼠（Matrigel 1:1混合）

监测：血清PSA水平（>4周后显著升高）

原位模型：

前列腺内注射（需超声引导，成瘤率约60%）

公司出售的产品：

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10? cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。