植酸含量检测试剂盒（分光光度法 50T/48S）

植酸（Saponin ）含量试剂盒说明书

                                                  分光光度法 50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定                                             

测定意义：

植酸又称肌酸、环己六醇六全-二氢磷酸盐，它主要存在于植物的种子、根干和茎中，其中以豆科植物的种子、谷物的麸皮和胚芽中含量最高。植酸作为螯合剂、抗氧化剂、保鲜剂、水的软化剂、发酵促进剂、金属防腐蚀剂等，广泛应用于食品、医药、油漆涂料、日用化工、金属加工、纺织工业、塑料工业及高分子工业等行业领域。

测定原理：

磺基水杨酸-氯化铁溶液显紫红色，在500nm下有最大吸光值。在pH6.0-6.5的环境下，植酸和铁离子结合使溶液颜色变淡，测定吸光度的降低来检测植酸含量。

试剂的组成和配制：

需自备仪器和用品：

可见分光光度计、烘箱、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、金属震荡仪、蒸馏水

植酸提取：

样本烘干，粉碎过筛，称取0.05g，加入1ml试剂一，震荡提取2h；8000g，25℃离心10min，取上清0.5ml，加入0.5ml试剂二，混匀后4℃静置2h，离心取上清待测。

测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。

2、测定管：取100μl上清，加入900μl试剂三，混匀后取1500μl加入96孔板，再加入500μl试剂四，充分混匀后，室温下静置5min，后离心取上清1000ul，测定500nm下吸光值A1。

3、空白液配制：取0.5ml试剂一和0.5ml试剂二混匀。

4、空白管：取100μl空白液，加入900μl试剂三，混匀后取1500μl加入96孔板，再加入500μl试剂四，充分混匀后，室温下静置5min，后离心取上清1000ul，测定500nm下吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。

植酸含量计算：

标准状态下的回归曲线为：y =4.0568x + 0.0096，R2 = 0.993；X为植酸钠标准品浓度（mg/ml），y为吸光值ΔA(A2-A1)。

植酸含量(mg/g干重)=（ΔA-0.0096）÷4.0568×V反总÷V样÷(W÷V样总) =4.93×（ΔA-0.0096）÷W

V反总：测定液总体积，1ml；V样：加入反应体系中样本体积，0.1ml； V样总：加入提取液总体积，2ml；W：样本干重，g。

注意事项：

若ΔA高于0.4，说明样本植酸浓度过高，需要加空白液适当稀释，并在计算结果中乘以相应的稀释倍数。