huh-7人肝癌细胞

huh-7人肝癌细胞

 细胞特性:

人肝癌细胞HuH-7是一种高分化的肝癌细胞。最初是由Nakabayshi H和Sato J于1982年建系，取自一名57岁的日本男性的肝脏肿瘤组织，目前是用于体外研究丙型肝炎病毒(HCV)和登革热病毒的细胞模型。据报道，该细胞表达甲胎蛋白，胰酶α抗体，血浆铜蓝蛋白，纤维蛋白原，纤维粘连蛋白等，也可以用无血清培养，会在培养基内分泌许多血清蛋白和alpha phyto蛋白。

1） 来源：肝

2） 形态：上皮细胞样，贴璧生长

3） 含量：>1x106  细胞数

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

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 1. 基础特性:

来源与背景

源自1982年日本一名57岁男性肝细胞癌患者的肿瘤组织，属高分化肝细胞癌模型。

关键特征：

保留部分肝细胞功能（如白蛋白分泌、CYP450代谢活性）。

典型上皮样形态，贴壁生长，易形成集落。

遗传特性

携带 TP53突变（Y220C）和 β-catenin激活突变（S45P），与肝癌发生相关。

染色体异常：常见8q增益（MYC基因扩增）和17p缺失（TP53位点）。

 2. 核心研究应用:

肝癌机制研究

用于探究Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等信号通路在肝癌进展中的作用。

构建耐药模型（如索拉非尼耐药株）或转移模型（通过EMT诱导）。

病毒学研究

丙型肝炎病毒（HCV）：经典宿主细胞，用于研究HCV复制周期及抗病毒药物筛选。

其他病毒：乙型肝炎病毒（HBV）、登革病毒（DENV）的感染模型。

药物开发与毒性测试

肝毒性评估（如对乙酰氨基酚损伤模型）。

纳米药物递送系统的靶向性测试。

 3. 培养条件与注意事项:

培养基

基础配方：DMEM（高糖） + 10% FBS + 1%双抗，37°C、5% CO。

特殊处理：

部分研究需添加非必需氨基酸（NEAA）或胰岛素-转铁蛋白-硒（ITS）以增强功能。

传代与冻存

消化：0.25%胰酶（含EDTA），80%融合时传代（1:3至1:6）。

冻存液：90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。

质量控制

定期检测支原体（如MycoAlert试剂盒）。

 注意事项：

污染防控：细菌污染：培养液浑浊、变黄，需添加抗生素（如青霉素-链霉素），污染严重时丢弃。

霉菌污染：显微镜下可见丝状/絮状漂浮物，需彻底消毒培养箱（过氧乙酸擦拭+紫外线照射），污染细胞立即丢弃。

支原体污染：无明显外观变化，需定期用PCR或荧光法检测，污染后可用支原体清除试剂处理。

操作规范：收到细胞后，先检查包装完整性及干冰状态，镜检细胞形态并拍照记录（40x、100x、200x）。

未开封细胞若污染或活性差（3天内反馈），可申请重发；客户操作失误导致问题不重发。

运输与保存：干冰运输：冻存管含1×10⁶ cells，收到后立即转入液氮或-80℃冰箱。

常温运输：T25培养瓶，收到后静置3-4小时稳定状态，再换液或传代。

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