"Huh-7:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCIH1666细胞类似产品::MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞
Rat Glomerular Endothelial细胞类似产品::NCIH747细胞、JeKo-1细胞、NCI747细胞
Jurkat77细胞类似产品::HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞类似产品::WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
Huh-7:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
HEK 293细胞类似产品::WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
Epstein-Barr-3细胞类似产品::SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞
T/G HA-VSMC细胞类似产品::OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Huh-7:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
PL-12细胞类似产品::MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
REC细胞类似产品::JROECL21细胞、SUD6细胞、C4-2B细胞
Y 1细胞类似产品::MESSA/Dx5细胞、U-251-MG细胞、P3J HR-1细胞
H-4-II-E细胞类似产品::8505C细胞、SNUC2A细胞、U-373-MG细胞
T-24细胞类似产品::SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
HCC-9724细胞类似产品::LN299细胞、L-6 myoblast细胞、697细胞
HeLaS3细胞类似产品::KP-N-RT-BM细胞、HCC0202细胞、AC29细胞
SUM-159-PT细胞类似产品::Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
NCIH322细胞类似产品::SW-1116细胞、H-865细胞、Henrietta Lacks cells细胞
HPMEC细胞类似产品::Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
NTERA2D1细胞类似产品::MARC145细胞、MGH-U3细胞、H2195细胞
PK13细胞类似产品::MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞
PECAPJ34细胞类似产品::BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
MCA-38细胞类似产品::MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞
SK-N-AS细胞类似产品::FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞
HCO细胞类似产品::SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
L- cell细胞类似产品::UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
K562细胞类似产品::SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
NSC34细胞类似产品::NTera 2/cl.D1细胞、H.Ep. #2细胞、LC1-Sq细胞
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WM 115细胞类似产品::FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞
CD-18细胞类似产品::B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
MC38细胞类似产品::QG56细胞、H-1238细胞、OCM1A细胞
QG-56细胞类似产品::SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞
Huh-7:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SCL-I细胞类似产品::WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
SK Mel 24细胞类似产品::Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞
AAV-293细胞类似产品::P19细胞、A1847细胞、HECV细胞
NTera 2细胞类似产品::N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
VERO C 1008细胞类似产品::IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
RPMI 8226细胞类似产品::LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞
RBSMC细胞类似产品::LNCaP-C4-2细胞、MDA MB231细胞、HFT 8810细胞
OAW42细胞类似产品::EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞
HSC6细胞类似产品::HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
Rabbit Kidney 13细胞类似产品::NCIH1650细胞、A2780CP70细胞、SK-N-BE2C细胞
HRIF细胞类似产品::CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
Normal fibroblast-10细胞类似产品::58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞
NCI-H1672细胞类似产品::BL2141细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞、OVCA432_Bast细胞
NK-92MI细胞类似产品::SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
H-209细胞类似产品::253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
HCC9724细胞类似产品::BIU87细胞、MRAEC细胞、T-47D细胞
AG06814-N细胞类似产品::H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
CT 26细胞类似产品::NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
293T/17细胞类似产品::SU-DHL-16细胞、IPEC1细胞、H1693细胞
H-841细胞类似产品::SUM 102PT细胞、MES-SA细胞、CEM/0细胞
COLO394细胞类似产品::373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞
NSI/1-Ag4-1细胞类似产品::NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞
TMK1细胞类似产品::HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞
FHL-124细胞类似产品::SK-MEL3细胞、SkChA-1细胞、LUDLU1细胞
MFE296细胞类似产品::SU-DHL1细胞、CCD-841CoTr细胞、HBL1细胞
CHO cell clone K1细胞类似产品::HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞
HEK 293-F细胞类似产品::TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
WIL2S细胞类似产品::TGW细胞、HOC细胞、SF-539细胞
INS1E细胞类似产品::HEC1B细胞、KTCTL140细胞、HEK 293T/17细胞
He-La细胞类似产品::NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞
5637细胞类似产品::2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
UCLA-SO-M14细胞类似产品::C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
GA-10细胞类似产品::NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
CEMx721.174.T2细胞类似产品::Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
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OCI Ly10细胞类似产品::SCL-1细胞、Vero-E6细胞、TJ905细胞
NUGC-3细胞类似产品::H-735细胞、HuLEC-5a细胞、KAT5细胞
Y 1细胞类似产品::MESSA/Dx5细胞、McCoy B细胞、32D CL3细胞
MT-4细胞类似产品::HPAC细胞、PANC0813细胞、BBE细胞
HOEC细胞类似产品::HT(H9)细胞、GDM1细胞、EA. hy 926细胞
SACC-83细胞类似产品::LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞
GL261细胞类似产品::GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
NT2细胞类似产品::T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
PL5细胞类似产品::PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
J 774A.1细胞类似产品::Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞
SW480E细胞类似产品::MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞
PLA801C细胞类似产品::MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
U-87 MG细胞类似产品::LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
ADR-RES细胞类似产品::SG231细胞、B-16细胞、Hs600T细胞
NCIH2291细胞类似产品::Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
HT 1197细胞类似产品::RFL 6细胞、HEK293-FT细胞、IALM细胞
COS-1细胞类似产品::OACP4C细胞、H-2172细胞、CL-34细胞
OCI-Ly19细胞类似产品::T84细胞、K-1735细胞、TNC-1B12B4细胞
Panc 03.27细胞类似产品::Scott细胞、PANC-04-03细胞、MAVER1细胞
NCI-H2452细胞类似产品::SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞
SK-Col-1细胞类似产品::H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
BeWo细胞类似产品::SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞
RT-BM 1细胞类似产品::B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞
RT-BM 1细胞类似产品::B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞
Detroit-562细胞类似产品::T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
NOMO-1细胞类似产品::786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
MIHA细胞类似产品::HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞
3396细胞类似产品::MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞类似产品::IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞类似产品::SW-1088细胞、NK92-MI细胞、HAEC细胞
NCIH1373细胞类似产品::H774细胞、BAR-T细胞、OVTOKO细胞
V-79-4细胞类似产品::HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞
SU-DHL-6细胞类似产品::SL-1细胞、H2227细胞、B-CPAP细胞
SACC-83细胞类似产品::LM-TK-细胞、SGC996细胞、HCC-38细胞
HNE-2细胞类似产品::KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
J774 A.1细胞类似产品::SNU-1040细胞、F-81细胞、MCA205细胞
H660细胞类似产品::TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
OKT 3细胞类似产品::SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞
Becker细胞类似产品::WI38细胞、L cell line细胞、PCI:SG231细胞
WIL2 Secreting细胞类似产品::H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
AR4IP细胞类似产品::D341 Med细胞、IEC 6细胞、SUDHL-16细胞
BEL-7405细胞类似产品::H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
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HBE 135-E6/E7细胞类似产品::FHL-124细胞、SCC 9细胞、HPMC细胞
QBI-HEK 293A细胞类似产品::EU-2细胞、MN9D细胞、CHAGOK1细胞
NCIH889细胞类似产品::LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
HEC-1B细胞类似产品::HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
Huh-7:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
OKa-C-1细胞类似产品::RPMI-1788细胞、C33细胞、N-87细胞
SuDHL 10细胞类似产品::Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
C33细胞类似产品::2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞
RBL-1细胞类似产品::RBVEC细胞、Hs 604.T细胞、GM00215细胞
CAL39细胞类似产品::SK-UT-1细胞、RBE细胞、BT-20细胞
JJN3细胞类似产品::DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞
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